肿瘤坏死因子α诱导脑血管内皮细胞产生病理性一氧化氮的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF—α）作用于脑血管内皮细胞产生病理性一氧化氮（NO）的机制。方法体外培养肿瘤坏死因子受体（TNFR1）基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞（BVEC／RI）和野生型小鼠脑血管内皮细胞（BVEC），分别给予5ng／ml TNF-α刺激24h后，应用PCR技术、Western blot方法、硝酸还原酶法，测定两种细胞的诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因mRNA和蛋白表达量以及所分泌的一氧化氮（NO）含量。结果①给予TNF—α刺激后，野生型BVEC的iNOS mRNA表达增加，BVEC／RI的iNOS mRNA表达未出现明显变化。②给予TNF—α刺激后，野生型BVEC的iNOS蛋白表达量（0．91±0．08）高于未给予TNF-α的BVEC（0．15±0．02），差异有统计学意义，P〈0．05；BVEC／RI的iNOS蛋白表达量（0．21±0．06）与未给予TNF—α的BVEC／RI（0．30±0．05）相比，差异无统计学意义，P〉0．05。③给予TNF-α刺激后，野生型BVEC的NO含量（58．6±2．6）μxmol／L]高于未给予TNF—α的BVEC（18．1±4．3）μmol／L]，差异有统计学意义，P〈0．05；BVEC／RI的NO含量（21．2±3．5）μmol／L]与未给予TNF-α的BVEC／RI（16．9±3．4）μmol／L]相比，差异无统计学意义，P〉0．05。结论TNF—α可能通过作用于脑血管内皮细胞TNFR1增加iNOS表达，从而增加病理性NO产生。