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| 胎鼠脊髓神经干细胞的分离培养、鉴定与诱导分化 | |
| 引用本文： | 雷德强,赵洪洋,邓兴力,刘如恩,张方成. 胎鼠脊髓神经干细胞的分离培养、鉴定与诱导分化[J]. 中风与神经疾病杂志, 2008, 25(3) |
| 作者姓名： | 雷德强 赵洪洋 邓兴力 刘如恩 张方成 |
| 作者单位： | 1. 华中科技大学附属协和医院神经外科,湖北,武汉430022 2. 昆明医学院第一附属医院神经外科,云南,昆明,650032 3. 卫生部中日友好医院神经外科,北京,100029 |
| 基金项目： | 教育部留学回国人员科研启动基金 |
| 摘 要： | 目的 探讨胚胎大鼠脊髓神经干细胞分离、培养、传代及鉴定的方法.方法显微解剖分离E14d胚胎大鼠脊髓组织,用机械吹打法制成单细胞悬液,接种于含有表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bF-GF)及N2的DMEM/F12(1:1)无血清培养基中培养,待形成克隆球后进行传代培养.取第3代培养的细胞分别进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定.结果 E14d胚胎大鼠脊髓组织细胞培养72h后可形成悬浮生长的神经球,7～10d后即可传代.经传代扩增后得到大量同源的Nestin免疫阳性的细胞克隆球,经诱导分化后大部分细胞分化为GFAP免疫阳性的星形胶质细胞和CNPase免疫阳性的少突胶质细胞,少量细胞分化为β-Ⅲ-tubulin免疫阳性的神经元.结论成功从胚胎大鼠脊髓组织中分离出神经干细胞,为进一步开展脊髓疾病的细胞移植治疗研究奠定了基础. |
| 关 键 词： | 神经干细胞 脊髓 大鼠 细胞培养 胎鼠 脊髓神经干细胞 分离培养 诱导分化 Isolation neural stem cells spinal identification 治疗研究 细胞移植 脊髓疾病 神经元 少突胶质细胞 星形胶质细胞 细胞分化 细胞克隆 阳性 免疫细胞 神经球 悬浮生长 |
Isolation, culture and identification of spinal cord-derived neural stem cells |
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