快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究

目的 应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析（multiple—Polymerase Chain Reaction—Single Strand Conformation Polymorphism，multi—PCR—SSCP）方法，快速、特异地同时检出耐异烟肼（isoniazid，INH）结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG基因的突变情况，并与直接测序（derictsequencing，DS）结果相比较，参照药敏试验，探讨该方法的可行性。 方法 根据结核分支杆菌的aphC启动子序列、inhA序列、katG序列，分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物，采用multi—PCR-SSCP技术，同时检测对结核分支杆菌耐INH起作用的这三个基因的突变情况；同时进行耐药株的测序分析。 结果 对H37Rv标准株、临床分离INH敏感株（23株）及INH耐药株（35株）进行multi—PCR—SSCP分析，突变检出率82．9％（29／35）；耐药株测序分析突变检出率为85．7（30／35）。两种方法的符合率为97．1％E（29＋5／）／35]。 结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索，multi—PCR—SSCP方法敏感、特异，能同时快速有效地检测结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG三个INH耐药基因的突变，提高检验效率，有望成为临床指导用药的好方法。

Study on the Method of Rapidly Detecting Isoniazid-resistant Isolates of Mycobacterium Tuberculosis