白假丝酵母荧光定量PCR鉴定方法的建立

目的真菌感染发病率和死亡率逐年增高,亟需建立主要病原真菌快速、敏感、特异的鉴定方法,对感染的早期诊治至关重要。方法以真菌线粒体COⅡ基因为靶标,设计白假丝酵母的特异性引物,建立荧光定量PCR鉴定方法,分析其灵敏度、特异性及重复性。结果该方法检测的灵敏度可达1×102copies/μl(相当于10-7 ng/μl),熔解曲线显示具有单一峰,且仅有白假丝酵母出现扩增曲线,其他种、属真菌均未见扩增。且具有较好的重复性和稳定性。结论建立的白假丝酵母荧光定量PCR鉴定方法灵敏度高、特异性强、重复性和稳定性好,适于临床真菌感染微量标本的快速检测。该研究为真菌核酸快速检测试剂盒的开发奠定了基础。