体外rhTNF-α对人精子运动、线粒体功能影响的实验研究

目的:观察重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)在体外对人正常精子运动、线粒体功能的影响.方法:56例健康成年男性手淫法获得精液,符合WHO精液正常标准者40例.Peroll梯度离心法得到的精子为精子模型,将精子密度调整为10×106/ml,与终浓度0.03、0.06、0.09、0.27μg/L的rhTNF-α分别在37℃、5%CO2的环境中孵育,同时设立空白对照组.分别在0.5、1、2、3、4 h取样:①10μl样本用于计算机辅助精液分析(CASA)检查精子运动参数变化.②250μl样本分别用终浓度均为10μg/ml的Rhl23和PI双染色精子,流式细胞仪检测精子线粒体功能的变化.结果:CASA检测结果表明rhTNF-α终浓度为0.06、0.09、0.27μg/L各组精子的活率、直线速度、曲线速度、平均速度、前向运动明显低于对照组(P＜0.01),且各组的线粒体功能良好的精子明显减少.精子运动参数降低的趋势分别与TNF-α浓度和孵育时间呈正相关,r值分别为0.675、0.691、0.762、0.693、0.724和0.571、0.594、0.752、0.791、0.816(P均＜0.01).线粒体功能良好的精子数目减少的趋势分别与TNF-α浓度和孵育时间呈正相关,r值分别为0.615、0.643、0.752、0.691、0.754和0.532、0.567、0.782、0.692、0.854(P均＜0.01).而rhTNF-α终浓度为0.03μg/L组精子的运动参数及线粒体功能与空白对照组相比差异无显著性(P＞0.05).结论:rhTNF-α可以降低人精子运动能力,同时线粒体功能也受一定的影响.提示rhTNF-α有可能通过干扰精子线粒体的能量代谢,而降低精子运动能力.

Experimental Study of the Effect of rhTNF-α on Human Sperm Mitochondrial Function and Motility in vitro