DNA 6 mA修饰在低剂量镉暴露SD孕鼠脐血中的表达研究

目的通过研究DNA N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenine,6 mA)修饰及其甲基化修饰酶基因在低剂量镉暴露Sprague Dawley(SD)孕鼠脐血中的表达,探讨6 mA表观遗传修饰对镉发育毒性的影响。方法模拟一代繁殖毒性试验构建低剂量镉暴露的SD孕鼠动物模型,以0、1.0、3.0和9.0 mg/kg·bw剂量对SD雌鼠连续灌胃氯化镉溶液90 d后进行交配,查到阴栓者定为孕第0天,持续染毒至孕第20天进行剖杀,收集脐血,提取DNA和RNA,斑点印迹(Dot blot)检测6 mA修饰水平,RT-qPCR检测6 mA修饰酶相关基因的相对表达水平。结果与对照组相比,各染毒组孕鼠之间的各项繁殖指数未见明显的差异,各染毒组胎鼠体重均明显降低(H=47.82,P<0.01),胎鼠身长、尾长等其他发育指标在个别染毒组出现异常。与对照组相比,各染毒组脐血6 mA修饰水平呈下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);染毒组6 mA甲基化转移酶N6AMT1表达水平较对照组有不同程度下降,其中9.0 mg/kg剂量组N6AMT1表达与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01);去甲基化酶ALKBH1和ALKBH4的表达水平较对照组有不同程度上升,其中3.0和9.0 mg/kg剂量组ALKBH1表达与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),9.0 mg/kg剂量组ALKBH4表达与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论SD孕鼠脐血中6 mA修饰酶的基因表达改变与镉暴露相关,DNA 6 mA表观遗传修饰可能对镉的发育毒性有影响。