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Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域片段获得及其表达载体的构建与转染
作者姓名:郭英  徐佳佳  商延芳  李楠  高峰  黄培林
作者单位:1. 东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009;南京中医药大学,病理学教研室,江苏,南京,210046
2. 东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009
摘    要:目的: 探讨应用基因重叠延伸拼接PCR (SOE-PCR)技术构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域表达载体,并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌细胞系.方法: 应用SOE-PCR法获得Reg Ⅳ缺失CRD 结构域片段,构建真核表达载体并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌LoVo细胞,G418筛选,RT-PCR检测鉴定.结果: 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,经pcDNA3.1-Reg Ⅳ-domain△转染的LoVo细胞Reg Ⅳ-domain △呈阳性表达.结论: 利用SOE-PCR技术可成功构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域的表达载体.

关 键 词:Reg Ⅳ  碳水化合物识别域  结直肠癌  基因转染  基因重叠延伸拼接PCR
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