Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域片段获得及其表达载体的构建与转染 |
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作者姓名: | 郭英 徐佳佳 商延芳 李楠 高峰 黄培林 |
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作者单位: | 1. 东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009;南京中医药大学,病理学教研室,江苏,南京,210046 2. 东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009 |
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摘 要: | 目的: 探讨应用基因重叠延伸拼接PCR (SOE-PCR)技术构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域表达载体,并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌细胞系.方法: 应用SOE-PCR法获得Reg Ⅳ缺失CRD 结构域片段,构建真核表达载体并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌LoVo细胞,G418筛选,RT-PCR检测鉴定.结果: 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,经pcDNA3.1-Reg Ⅳ-domain△转染的LoVo细胞Reg Ⅳ-domain △呈阳性表达.结论: 利用SOE-PCR技术可成功构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域的表达载体.
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关 键 词: | Reg Ⅳ 碳水化合物识别域 结直肠癌 基因转染 基因重叠延伸拼接PCR |
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