ERK5信号通路参与BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞的分化

目的：研究细胞外信号调节激酶5（extracellular signal-regulated kinase 5，ERK5）信号通路在骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9，BMP9）诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法：用AdBMP9和AdGFP转染C3H10T1/2细胞，流式细胞术检测转染效率，Western blot检测磷酸化ERK5（phosphorylation ERK5，p-ERK5）和ERK5的表达水平，免疫荧光检测p-ERK5在细胞内的表达位置；ERK5特异性抑制剂BIX02189预处理细胞再经AdBMP9诱导，Western blot检测p-ERK5和ERK5表达水平，RT-qPCR检测心肌特异性基因肌细胞增强因子（myocyte enhancer factor，MEF）2C、GATA结合蛋白4（GATA binding protein 4，GATA4）表达，Western blot检测心肌特异性蛋白缝隙连接蛋白４３（connexin 43，CX43）、心肌肌钙蛋白T（cardiac troponin T，cTnT）表达。结果：AdGFP与AdBMP9的转染效率达50%左右，经AdBMP9诱导后的细胞p-ERK5表达明显增高（P＜0.01），免疫荧光结果显示BMP9组p-ERK5表达明显增强且主要集中于胞核；15 ?滋mol/L BIX02189可完全抑制p-ERK5的表达（P＜0.01），且明显降低了由AdBMP9诱导的C3H10T1/2细胞GATA4、MEF2C基因与CX43、cTnT蛋白表达（P=0.000）。结论：BMP9可以通过激活ERK5信号通路调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。

Involvement of ERK5 signaling pathway in the cardiomyocyte-like differentiation of C3H10T1/2 cells induced by bone morphogenetic protein 9