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柯萨奇病毒A16型快速纯化和中和性单克隆抗体制备与鉴定
引用本文:刘杨,赵向绒,关璐媛,王鑫,郭春艳,封青,卫晶晶,胡军,余鹏博. 柯萨奇病毒A16型快速纯化和中和性单克隆抗体制备与鉴定[J]. 国际检验医学杂志, 2015, 0(14)
作者姓名:刘杨  赵向绒  关璐媛  王鑫  郭春艳  封青  卫晶晶  胡军  余鹏博
作者单位:1. 陕西省人民医院中心实验室,陕西西安710068; 陕西省疾病预防控制中心病毒室,陕西西安710054
2. 陕西省人民医院中心实验室,陕西西安,710068
3. 陕西省疾病预防控制中心病毒室,陕西西安,710054
4. 韩城疾病预防控制中心,陕西韩城,715400
基金项目:病毒性传染病病原谱流行规律及变异研究(2013ZX10004202-001-002)。
摘    要:目的建立柯萨奇病毒A16型快速纯化方法,制备中和性单抗,并对单抗进行分析。方法收获CA16培养上清液,超滤浓缩,氯化铯密度梯度离心纯化病毒颗粒,透射电镜鉴定纯化产物。福尔马林灭活CA16,免疫BALB/c小鼠,制备分泌抗CA16特异性单抗的杂交瘤细胞系,用ELISA和中和试验分别对单抗特性进行分析。结果初步建立CA16病毒氯化铯密度梯度纯化方法,电镜显示,病毒颗粒为二十面体立体对称球形结构,病毒直径在20~30nm间,大小均匀。获得2株分泌抗CA16单抗的杂交瘤细胞系,2株单抗均为IgG2a亚型,Anti/CA16/5效价为103,Anti/CA16/10效价为104。2株抗体的中和效价分别为1∶256和1∶1 024。结论初步建立氯化铯密度梯度纯化CA16的方法,筛选出2株具有中和活性的抗CA16单抗,为CA16病毒的基础研究提供重要的原材料。

关 键 词:病毒纯化  超速离心  单克隆抗体

Purification of coxsackievirus A16 viral particles and preparation and identification of neutralizing monoclonal antibody against coxsackievirus A16
LiuYang,ZhaoXiangrong , GuanLuyuan,Wang Xin,GuoChunyan , Feng Qing,Wei Jingjing,Hu Jun,Yu Pengbo. Purification of coxsackievirus A16 viral particles and preparation and identification of neutralizing monoclonal antibody against coxsackievirus A16[J]. International Journal of Laboratory Medicine, 2015, 0(14)
Authors:LiuYang  ZhaoXiangrong    GuanLuyuan  Wang Xin  GuoChunyan    Feng Qing  Wei Jingjing  Hu Jun  Yu Pengbo
Abstract:
Keywords:Virus purification  ultracentrifugation  Monoclonal antibody
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