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永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子、细胞周期蛋白B1和PTEN的表达
引用本文:胡梦竹,王娟,张巧,高社干,张功员.永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子、细胞周期蛋白B1和PTEN的表达[J].第三军医大学学报,2016(13):1512-1516.
作者姓名:胡梦竹  王娟  张巧  高社干  张功员
作者单位:1. 郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室,郑州,450001;2. 河北省人民医院病案统计室,石家庄,050000;3. 郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,郑州,450001;4. 河南科技大学第一附属医院肿瘤内科,河南洛阳,471000
基金项目:河南省基础与前沿技术研究计划项目(132300410129),Supported by the Project of Basic and Advanced Technology Research Plan of Henan Province (132300410129)
摘    要:目的 观察核于细胞因子(nucleostemin,NS)、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)及抑癌基因PTEN mRNA和蛋白的表达情况.方法 正常食管上皮细胞(shantou human embryonic esophageal epithelial cell line,SHEE)和永生化食管上皮恶变细胞(shantou human embryonic esophageal carcinoma epithelial cell line,SHEEC)连续传代培养,取对数生长期SHEE和SHEEC细胞,采用RT-PCR及Western blot方法检测细胞中NS、Cyclin B1及PTEN mRNA和蛋白的表达并做相关性分析,MTT法检测抑制NS表达后的细胞增殖活性.结果 以SHEE细胞中NS、Cyclin B1和PTEN mRNA的表达量为1,SHEEC细胞中对应的相对表达量分别为(2.047±0.507)、(2.214 ±0.213)及(0.668 ±0.188),两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);SHEE及SHEEC细胞中NS、Cyclin B1及PTEN蛋白表达量分别为(1.142±0.113),(3.161 ±0.108)、(1.585 ±0.056),(2.173 ±0.058)及(1.894 ±0.341),(1.162 ±0.524),两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);NS mRNA和蛋白与Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达呈正相关(r=0.832,P<0.01;r=0.991,P<0.05),与PTEN mRNA和蛋白的表达呈负相关(r=-0.924,P<0.01;r=-0.769,P<0.05);MTT检测结果显示,NS RNA干扰(RNA interference,RNAi)组与空白对照组和阴性对照组在干扰后12 h细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),而在干扰后24、36、48 h差异有统计学意义(P<0.05).结论 SHEEC细胞中NS、Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达量均高于SHEE,而PTEN的表达量低于SHEE,NS可能对细胞恶变有影响.

关 键 词:永生化食管上皮恶变细胞  核干细胞因子  细胞周期蛋白B1  PTEN

Expression of nucleostemin,Cyclin B1 and PTEN in immortalized esophageal epithelial malignant cells
Abstract:
Keywords:Shantou human embryonic esophageal carcinoma epithelial cell line  nucleostemin  Cyclin B1  phosphatase and tensin homolog
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