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hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响
引用本文:冯伟,夏培元,孙艺璇,孙凤军. hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响[J]. 第三军医大学学报, 2016, 0(2): 107-111. DOI: 10.16016/j.1000-5404.201506016
作者姓名:冯伟  夏培元  孙艺璇  孙凤军
作者单位:第三军医大学西南医院药剂科,重庆,400038
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金(81301397)Supported by the National Natural Science Foundation for Young Scholars of China (81301397).
摘    要:目的 建立大肠埃希菌Red重组系统无痕敲除方法,探讨hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响.方法 以大肠埃希菌MG1655为研究对象,将pKD46质粒转化入MG1655感受态细胞.以质粒pKD3为模板扩增氯霉素抗性基因片段,并将其转化入MG1655/pKD46,氯霉素抗性平板筛选阳性克隆.利用pCP20质粒删除氯霉素抗性基因,构建MG1655 hns基因缺失菌株.96孔板结晶紫染色法分析MG1655 hns基因缺失株生物膜形成能力的变化.苯酚-硫酸法检测细菌胞外多糖含量.结果 氯霉素抗性基因消除后的hns基因缺失株PCR产物长度为434 bp,测序鉴定正确,成功构建MG1655 △hns基因缺失株.MG1655△hns菌株生物膜形成能力和胞外多糖产生显著低于MG1655(P<0.01).结论 利用Red重组技术成功构建出MG1655△hns菌株,hns基因对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用.

关 键 词:大肠埃希菌  生物膜  胞外多糖  hns基因  基因敲除

Effect of hns gene on biofilm formation of Escherichia coli
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  biofilm  extracellular polymeric substance  hns gene  gene knockout
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