hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响 |
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引用本文: | 冯伟,夏培元,孙艺璇,孙凤军. hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响[J]. 第三军医大学学报, 2016, 0(2): 107-111. DOI: 10.16016/j.1000-5404.201506016 |
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作者姓名: | 冯伟 夏培元 孙艺璇 孙凤军 |
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作者单位: | 第三军医大学西南医院药剂科,重庆,400038 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年科学基金(81301397)Supported by the National Natural Science Foundation for Young Scholars of China (81301397). |
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摘 要: | 目的 建立大肠埃希菌Red重组系统无痕敲除方法,探讨hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响.方法 以大肠埃希菌MG1655为研究对象,将pKD46质粒转化入MG1655感受态细胞.以质粒pKD3为模板扩增氯霉素抗性基因片段,并将其转化入MG1655/pKD46,氯霉素抗性平板筛选阳性克隆.利用pCP20质粒删除氯霉素抗性基因,构建MG1655 hns基因缺失菌株.96孔板结晶紫染色法分析MG1655 hns基因缺失株生物膜形成能力的变化.苯酚-硫酸法检测细菌胞外多糖含量.结果 氯霉素抗性基因消除后的hns基因缺失株PCR产物长度为434 bp,测序鉴定正确,成功构建MG1655 △hns基因缺失株.MG1655△hns菌株生物膜形成能力和胞外多糖产生显著低于MG1655(P<0.01).结论 利用Red重组技术成功构建出MG1655△hns菌株,hns基因对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用.
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关 键 词: | 大肠埃希菌 生物膜 胞外多糖 hns基因 基因敲除 |
Effect of hns gene on biofilm formation of Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | Escherichia coli biofilm extracellular polymeric substance hns gene gene knockout |
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