| BMPs-ERK5信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究 |
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| 引用本文： | 蒋琳,周鹏飞,王佳,张燕. BMPs-ERK5信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究[J]. 第三军医大学学报, 2016, 0(7): 718-725. DOI: 10.16016/j.1000-5404.201507192 |
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| 作者姓名： | 蒋琳 周鹏飞 王佳 张燕 |
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| 作者单位： | 1. 401147重庆,重庆医科大学附属口腔医院预防口腔科;401147重庆,重庆医科大学附属口腔医院重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室;2. 重庆医科大学附属口腔医院口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室,重庆,401147;3. 重庆医科大学附属口腔医院重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室,重庆,401147 |
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| 基金项目： | 重庆市自然科学基金一般项目(CSTC2012jjA10156)，重庆市渝北区科研项目[2014(社)16号]，重庆高校创新团队建设计划(2013) Supported by the Natural Science Foundation of Chongqing (CSTC2012jjA10156) |
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| 摘 要： | 目的 比较骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)2、7、9对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化的诱导作用,探讨BMPs-ERK5信号通路在成骨分化中的作用.方法 首先采用组织块酶消化法分离培养原代hPDLSCs并鉴定,利用腺病毒载体介导的GFP、BMP2、BMP7和BMP9(Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-BMP7、Ad-BMP9)分别感染hPDLSCs,通过早期成骨分化指标碱性磷酸酶活性定性和定量检测、茜素红染色检测晚期成骨分化指标钙盐结节沉积情况、qRT-PCR检测细胞成骨分化相关基因骨钙蛋白和骨桥蛋白mRNA表达,比较发现BMP9对细胞成骨分化的作用最强;采用Ad-BMP9感染hPDLSCs 24 h后,检测BMP9作用PDLSCs后对ERK5磷酸化水平的影响和ERK5信号通路特异性抑制剂BIX02189预处理后BMP9-ERK5通路对hPDLSCs成骨分化的影响.结果 ①分离培养的hPDLSCs为成纤维细胞样,呈漩涡状生长,抗波形蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性,具有间充质属性和克隆形成能力.②BMP2、BMP7和BMP9均有促进细胞成骨分化作用,其中3组的碱性磷酸酶定量结果和成骨分化相关基因相对表达量与GFP组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),且BMP9效力最强.③Western blot检测显示BMP9增强p-ERK5的表达.而抑制剂BIX02189呈剂量依赖性地抑制p-ERK5的表达.BIX02189预处理细胞后、感染Ad-BMP9的结果显示,BMP9对细胞的促成骨作用较未处理组明显降低,其中BMP9组的碱性磷酸酶定量分析结果与成骨分化相关基因相对表达量与BIX02189处理组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 BMP9具有较强的促hPDLSCs成骨分化作用,ERK5信号转导途径在BMP9诱导hPDLSCs成骨分化过程中发挥了正向调节作用.
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| 关 键 词： | 骨形态发生蛋白 牙周膜干细胞 成骨分化 细胞外信号调节激酶5 |
Bone morphogenetic proteins-ERK5 signaling pathway mediates osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bone morphogenetic protein periodontal ligament stem cells osteogenic differentiation extracellular signal-regulated kinase 5 |
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