| 分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 吕琳,曹红丹,王丕龙,刘少宁,王丽娟,向廷秀.分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70的构建及鉴定[J].第三军医大学学报,2008,30(10):890-893. |
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| 作者姓名： | 吕琳 曹红丹 王丕龙 刘少宁 王丽娟 向廷秀 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学附属第一医院消化内科,重庆,400016
2. 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，重庆市卫生局资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 用结核分枝杆菌热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)启动子改建分枝杆菌穿梭质粒pJEM11为分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70,并对其功能进行鉴定.方法 以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HSP70启动子,克隆至pMD18-T载体,经鉴定后,再定向克隆入pJEM11的Apa Ⅰ位点与SnaB Ⅰ位点之间,构建pJHSP70载体,并对载体进行PCR及酶切鉴定,然后再将幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)尿素酶B亚单位(urease B subunit,UreB)基因克隆入pJHSP70载体,评价其在耻垢分枝杆菌(Mycobacteria smegmatis,M. smegmatis)mc2 155中的表达情况.结果 从BCG基因组中扩增出160 bp的基因片段,所构建的穿梭质粒经酶切和PCR鉴定与预期结果一致.测序结果证实插入片段正确,UreB基因在M. smegmatis中成功表达.结论 成功改建穿梭质粒pJEM11为穿梭表达质粒pJHSP70.
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 热休克蛋白70 启动子 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-5404(2008)10-0890-04 |
| 修稿时间： | 2007年9月28日 |
Construction and identification of Mycobacterium shuttle expression plasmid pJHSP70 |
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| LU Lin,CAO Hong-dan,WANG Pi-long,LIU Shao-ning,WANG Li-juan,XIANG Ting-xiu.Construction and identification of Mycobacterium shuttle expression plasmid pJHSP70[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2008,30(10):890-893. |
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| Authors: | LU Lin CAO Hong-dan WANG Pi-long LIU Shao-ning WANG Li-juan XIANG Ting-xiu |
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| Institution: | LU Lin1,CAO Hong-dan1,WANG Pi-long1,LIU Shao-ning1,WANG Li-juan1,XIANG Ting-xiu2(1Department of Gastroenterology,2Experiment Research Center,The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70 promoter gene expression |
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