| 用IE—HPLC、PAGE分析合成的硫代寡核苷酸相关物质“n—1”、“n—2”和“n—3” |
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| 引用本文： | 李麒麟,周建,王小行,高小平.用IE—HPLC、PAGE分析合成的硫代寡核苷酸相关物质“n—1”、“n—2”和“n—3”[J].药物分析杂志,2002,22(5):371-375. |
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| 作者姓名： | 李麒麟 周建 王小行 高小平 |
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| 作者单位： | 成都地奥制药集团药物研究所，成都地奥制药集团药物研究所，成都地奥制药集团药物研究所，成都地奥制药集团药物研究所 成都 610041，成都 610041，成都 610041，成都 610041 |
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| 摘 要： | 目的:分析合成的n=20-mer硫代寡核苷酸中相关物质“n-1”、“ n-2”和“ n-3”杂质失败序列。方法:离子交换高效液相色谱(IE-HPLC)法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)。色谱柱为Gen-Pak~(TM)FAX离子交换柱(4.6 mm×100mm),流动相A为62.5mmol·L~(-1)三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris·Cl),pH 8.15,流动相B为62.5mmol·L~(-1) Tris·Cl,pH 8.15,2.5 mol·L~(-1) LiCl,流动相C为100％乙腈;梯度洗脱条件为B:30％→50％ 30 min,C:恒为20％;流速为0.75mL·min~(-1);检测波长为260nm。PAGE分析采用20％变性聚丙烯酰胺凝胶,恒定功率25W进行电泳。结果:IE-HPLC分离纯化出3种相关物质,通过PAGE印证了它们是由于合成偶联不完全而产生的n-1、n-2和n-3的杂质失败序列。结论:所用离子交换高效液相色谱法能将合成的硫代寡核苷酸中相关物质“n-1”、“n-2”和“n-3”杂质失败序列与全序列n一一分离出来,对硫代寡核苷酸的纯化和分析具有重要的参考价值。
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| 关 键 词： | 硫代反义寡核苷酸 相关物质 离子交换 高效液相色谱法 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 “n－1” “n－2” “n－3” |
Analysis of Relative Substances "n -1" , "n -2" and "n -3" Synthetic Phosphorothioate Oligonucleotides with IE - HPLC and PAGE |
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| LI Qi - lin,ZHOU Jian,WANG Xiao - xing and GAO Xiao - ping.Analysis of Relative Substances "n -1" , "n -2" and "n -3" Synthetic Phosphorothioate Oligonucleotides with IE - HPLC and PAGE[J].Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis,2002,22(5):371-375. |
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| Authors: | LI Qi - lin ZHOU Jian WANG Xiao - xing and GAO Xiao - ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phosphorothioate oligonucleotides ( SODN ) relative substance IE - HPLC polyacrylamide gle electrophoresis ( PAGE ) |
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