体内pBR322DNA的拓扑异构现象

从大肠杆菌清亮裂解液直接抽提的质粒pBR322DNA可被凝胶电泳分成五条明显的区带。电镜分析表明,pBR322单体超螺旋DNA及由超螺旋单体组成的连环寡聚体或多聚体;pBR322DNA的松弛型单体及其连环聚合体;松弛型的。BR322环状二聚体DNA和由它组成的连环聚合体各组成这种质粒DNA凝胶电泳的第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区带。这个事实证明DNA的连环聚合体有着特殊的电泳行为。电镜和电泳的分析表明体内的pBR322DNA存在着一类独特的但是重要的拓扑异构体——“花型结构”DNA。电镜资料还显示可能是由DNA链的交叉(半连环)联系的多股双链DNA组成的复合链的存在。本文对大肠杆菌染色体DNA的折迭过程与两类DNA拓扑异构酶的关系作了讨论。