| 基因1b型不同准种株HCV核心蛋白原核表达质粒pTrc—CKS构建及诱导表达 |
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| 引用本文： | 汪明珊,颜学兵,周林福,侯晓丽,李杨霞,温晓芳,姜云水,陈智.基因1b型不同准种株HCV核心蛋白原核表达质粒pTrc—CKS构建及诱导表达[J].中华实验和临床感染病杂志（电子版）,2009,3(2):5-8. |
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| 作者姓名： | 汪明珊 颜学兵 周林福 侯晓丽 李杨霞 温晓芳 姜云水 陈智 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院附属医院感染病科,徐州市,221002
2. 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金，江苏省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 为研究与不同准种HCV 核心蛋白(Core)相互作用的细胞蛋白质组,构建并表达基因1b型的不同准种Core的原核表达质粒pTrc-CKS.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增并获得等长度片段的基因1b型的不同准种株丙型肝炎病毒(HCV)Core基因,氨基酸(aa)长度分别为癌中心株(T):1～172 aa、癌旁株(NT):1～172 aa及C191(HCV-J6):1～172 aa.扩增产物用Bam HⅠ及Eco RⅠ双酶切后插入到原核表达质粒pTrc-CKS中.阳性克隆转化到大肠埃希菌Top 10F'中,异丙基-β-D-S-代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得融合蛋白CKS-Core-His,经Ni2+10F'柱纯化并经Western blot验证.结果 PCR及双酶切验证表明3个基因为1b型的不同准种Core基因成功构建到原核质粒pTrc-CKS中,体外诱导并获得了相应的融合蛋白.结论 构建不同准种Core基因的原核表达质粒获得成功,体外诱导表达并纯化获得了CKS-Core-His融合蛋白,为后续研究与Core相互作用的细胞蛋白质组奠定了基础.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 核心蛋白 质粒构建 |
Construction and expression of plasmids containing the truncated core protein of different quasispecies genotype 1b hepatitis C virus |
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| WANG Ming-shan,YAN Xue-bing,ZHOU Lin-fu,HOU Xiao-li,LI Yang-xia,WEN Xiao-fang,JIANG Yun-shui,CHEN Zhi.Construction and expression of plasmids containing the truncated core protein of different quasispecies genotype 1b hepatitis C virus[J].Chinese Journal of Experimental and Clinical Infectious Diseases(Electronic Version),2009,3(2):5-8. |
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| Authors: | WANG Ming-shan YAN Xue-bing ZHOU Lin-fu HOU Xiao-li LI Yang-xia WEN Xiao-fang JIANG Yun-shui CHEN Zhi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pTrc-CKS |
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