丙型肝炎病毒E2蛋白在大肠杆菌中的表达及初步纯化 |
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作者姓名: | 谢尧 陶其敏 |
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作者单位: | 北京医科大学人民医院肝病研究所!100044 |
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摘 要: | HCVE2抗体在慢性HCV感染中有较高的检出率(80%~97%),与病毒血症密切相关,抗体滴度与病毒复制、HCVRNA的滴度相关。本研究在大肠杆菌中高效表达了HCVEZ蛋白,并进行了蛋白的初步纯化。用分子克隆技术,将HCVE2基因连接到非融合蛋白的原核表达载体PKK223-3上,并转化大肠杆菌,经扩大培养,提取质粒进行酶切鉴定而获得含有E2基因的阳性克隆(pKKE2)。挑取E2阳性克隆单个苗落接种于1ml培养基中,37℃振摇培养,细菌生长至对数生长期时,加入IPTG诱导E2蛋白表达5小时。离心去…
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