| NT4-GFP-Ant重组腺相关病毒载体的构建及病毒包装、滴度测定 |
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| 引用本文： | 吴昊,吴江,杨宇,孙欣,杨广笑,王全颖.NT4-GFP-Ant重组腺相关病毒载体的构建及病毒包装、滴度测定[J].中风与神经疾病杂志,2007,24(3):263-265. |
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| 作者姓名： | 吴昊 吴江 杨宇 孙欣 杨广笑 王全颖 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学第一医院神经内科,吉林,长春,130021
2. 西安华广生物工程有限公司,陕西,西安,710000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;吉林省科技厅科研项目;吉林大学研究生创新项目 |
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| 摘 要： | 目的为使基因治疗时,较大分子的功能蛋白能通过血脑屏障,构建NT4-GFP-Ant重组腺相关病毒载体,包装重组病毒,并测定滴度。为进一步动物实验研究该重组病毒液感染鼻粘膜细胞,在鼻粘膜内表达的大分子融合蛋白沿“鼻-脑”通路人脑的可行性奠定基础。方法将已构建成功的NT4-GFP-Ant融合基因插入病毒载体质粒PSSHG中,构建重组腺相关病毒载体质粒,酶切电泳鉴定。用腺病毒辅助质粒PFG140、包装质粒pAAV/Ad及已构建的重组腺伴随病毒载体质粒,三质粒磷酸钙共沉淀法转染80％融合的293细胞系,包装重组腺病毒（rAAV）。回收病毒、斑点杂交方法测定重组病毒滴度。结果成功构建了重组腺相关病毒质粒PSSHG/NT4-GFP- Ant。包装、回收病毒后斑点杂交方法测定重组病毒滴度为3．36×10^9 PFU/ml。结论成功构建了PSSHG/NT4- GFP-Ant重组腺相关病毒载体,并成功包装了较高浓度的重组病毒。
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白基因 信号引导肽 穿膜肽 重组腺伴随病毒载体 |
| 文章编号： | 1003-2754（2007）03-0263-03 |
| 修稿时间： | 2006-12-22 |
The construction and production of NT4-GFP-Ant recombinant adeno-associated virus |
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| WU Hao, WU Jiang, YANG Yu,et al..The construction and production of NT4-GFP-Ant recombinant adeno-associated virus[J].Journal of Apoplexy and Nervous Diseases,2007,24(3):263-265. |
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| Authors: | WU Hao WU Jiang YANG Yu |
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| Institution: | Department of Neurology,The First Hospital of JILIN University,Changchun 130021 ,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Green fluorescent protein(GFP) Neurotrohphin-4(NT4) Antennapedia(Ant) Recombinant adeno-associated virus(rAAV) |
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