摘 要: | 用基因重组的方法,将γ-IFNcDNA 片段用EcoRI单酶插入到原核表达载体pBV220 中,筛选得到带有正向串联了2个γIFNcDNA 片段的阳性重组质粒,转化大肠杆菌DH5α后,建立了γ- IFN 的原核表达体系。经温度诱导培养,SDS-PAGE、Western- blot、SDS- PAGE 光密度扫描检测证实:该体系可高效表达γ- IFN 蛋白,表达量占菌体可溶性蛋白的40 %以上。病变抑制法测活表明:表达产物具有γ- IFN 的抗病毒活性。这一体系的建立为大规模发酵生产γ- IFN 提供了可靠的工程菌株,为进一步研究其分离纯化工艺提供了重要的实验模型。
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