P物质对HaCaT细胞一氧化氮合成的影响

目的 观察P物质、NK1受体拮抗剂和一氧化氮合酶（NOS）抑制剂对体外培养的人永生化角质形成细胞株HaCaT细胞一氧化氮（NO）分泌和诱生型NOS（iNOS）表达的影响。方法 用不同浓度P物质（10-9 ～ 10-6 mol/L）或联合应用10-8 mol/L P物质和3 × 10-7 mol/L spantide、10-7 mol/L氨基胍、10-6 mol/L 7-硝基吲唑、10-5 mol/L L-NAME处理HaCaT细胞24 h，硝酸还原酶法测定培养上清液中NO含量。HaCaT细胞中加入10-8 mol/L P物质，1 h、24 h、48 h后用RT-PCR检测iNOS mRNA表达。结果 10-9 ～ 10-6 mol/L P物质可诱导HaCaT细胞分泌NO，其中以10-8 mol/L P物质效应最明显。Spantide在各个时间点上（30 min及1、3、6、12、24 h）均可明显抑制P物质诱导的HaCaT细胞NO合成（P < 0.01），L-NAME组在3个时间点上（30 min、1 h、24 h）、7-硝基吲唑组在30 min、1 h后HaCaT细胞NO水平明显低于P物质组（P < 0.05），但氨基胍组与P物质组在各个时间点上差异均无统计学意义（P > 0.05）。10-8 mol/L P物质处理HaCaT细胞后24 h、48 h，iNOS mRNA表达量分别为0.199 ± 0.018、0.516 ± 0.030，两个时间点之间差异有统计学意义（P < 0.01）。结论 P物质可通过激活细胞上NK1受体促进HaCaT细胞分泌NO，但iNOS可能不是P物质诱导HaCaT细胞分泌NO的主要来源。

Effects of substance P on nitric oxide synthesis in HaCaT cells