应用噬菌体随机肽库筛选2型登革病毒E蛋白的抗原表位 |
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引用本文: | 魏惠永,江丽芳,郭辉玉.应用噬菌体随机肽库筛选2型登革病毒E蛋白的抗原表位[J].中山大学学报(医学科学版),2002,23(Z1):10-13. |
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作者姓名: | 魏惠永 江丽芳 郭辉玉 |
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作者单位: | 1. 广东省人民医院中心实验室 2. 中山大学中山医学院微生物学教研室,广东,广州,510089 |
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基金项目: | 广东省自然科学基金资助项目 ( 2 0 10 36 ) |
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摘 要: | 【目的】通过型特异性单抗与噬菌体随机 12肽库的生物淘洗 ,确定 2型登革病毒E蛋白分子的抗原表位。【方法】以DEN2型特异的E单克隆抗体作为筛选分子 ,生物淘洗噬菌体随机 12肽库 ,将筛选的噬菌体阳性克隆进行ELISA检测、DNA序列测定及展示肽的氨基酸序列推导 ,通过展示肽序列与DEN2E蛋白的氨基酸一级结构的对比 ,确定E蛋白的抗原优势表位并用相应的合成肽验证。【结果】常规生物淘洗获得富含芳香族氨基酸并有aHWbW核心结构的克隆 ,确定为非特异的塑料结合噬菌体。改进淘洗方法后 ,肽库筛选的噬菌体阳性克隆有共同的结构模体WFKKGS ,与DEN2E蛋白分子的 390~ 397有 3~ 5个氨基酸相同。其对应的合成 10肽能与淘洗单抗特异反应 ,并可抑制噬菌体阳性克隆与该单抗结合。【结论】本实验通过噬菌体随机肽库的生物淘洗确定DEN2E蛋白 390~ 397氨基酸残基 (WFKKGSSI)存在一线性的B细胞抗原表位。
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关 键 词: | 登革病毒 E蛋白 噬菌体随机肽库 抗原表位 |
文章编号: | 1000-257X(2002)5S-0010-04 |
修稿时间: | 2002年7月25日 |
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