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体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法
引用本文:尹寿新,周 震,马美雪,杨景波,羊东晔. 体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(29): 4663-4668. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.29.013
作者姓名:尹寿新  周 震  马美雪  杨景波  羊东晔
作者单位:中南大学湘雅二医院消化内科,湖南省长沙市 410011;长沙市第一医院消化内科,湖南省长沙市 410005;徐州市中心医院消化内科,江苏省徐州市 221009
基金项目:2010年国家自然科学基金(81072037)
摘    要:
背景:肝卵圆细胞是目前公认的成体肝干/祖细胞,但其体外长期培养时会不可避免地丢失干细胞的活性。目的:探索大鼠肝卵圆细胞体外长期培养的方法。方法:构建2-乙酰胺基芴/部分肝切除肝再生大鼠模型,通过酶消化和Percoll梯度离心分离纯化大鼠异质卵圆细胞并进行免疫染色鉴定,用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外长期培养,后撤去表皮生长因子、白血病抑制因子,通过形态学的观察和分子标志物的检测判断其能否保持干/祖细胞活性。结果与结论:采用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外培养卵圆细胞4个月后,大鼠异质卵圆细胞仍能表达肝细胞标志物ALB、胆管上皮细胞标志物CK-19,经不含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养液继续培养后,卵圆细胞胎肝标志AFP表达量迅速下降。该研究结果表明大鼠肝卵圆细胞在表皮生长因子、白血病抑制因子等培养条件下可长期增殖并保持干细胞活性。中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接:

关 键 词:组织构建  组织工程  卵圆细胞  长期培养  表皮生长因子  白血病抑制因子  国家自然科学基金  

Long-term culture of hepatic oval cells in rats in vitro
Yin Shou-xin,Zhou Zhen,Ma Mei-xue,Yang Jing-bo,Yang Dong-ye. Long-term culture of hepatic oval cells in rats in vitro[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(29): 4663-4668. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.29.013
Authors:Yin Shou-xin  Zhou Zhen  Ma Mei-xue  Yang Jing-bo  Yang Dong-ye
Affiliation:Department of Gastroenterology & Hepatology, the Second Xiangya Hospital of Central South University, Changsha 410011, Hunan Province, China; Department of Gastroenterology & Hepatology, the First Changsha Hospital, Changsha 410005, Hunan Province, China; Department of Gastroenterology & Hepatology, Xuzhou Central Hospital, Xuzhou 221009, Jiangsu Province, China
Abstract:
BACKGROUND: Hepatic oval cells are recognized as stem/progenitor cells currently, however, long-term culture of hepatic oval cells can inevitably result in the loss of cell activity.
Keywords:hepatocytes  epidermal growth factor  leukemia inhibitory factor  cells  cultured  
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