| 稳定表达丙型肝炎病毒复合多表位基因P815细胞克隆的建立 |
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| 引用本文： | 韦三华,尹文,雷迎峰,胡兴斌,杨敬,吕欣,孙梦宁,徐志凯.稳定表达丙型肝炎病毒复合多表位基因P815细胞克隆的建立[J].第四军医大学学报,2006,27(1):38-41. |
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| 作者姓名： | 韦三华 尹文 雷迎峰 胡兴斌 杨敬 吕欣 孙梦宁 徐志凯 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30371280） |
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| 摘 要： | 目的：构建丙型肝炎病毒（HCV）多表位基因的真核表达载体，获得重组质粒稳定转染的P815细胞克隆．方法：PCR方法扩增核心区羧基端部分缺失的基因片段Ct；合成HCVE2区模拟表位和NS3～NS5七个T细胞表位基因Em；分别克隆入穿梭质粒载体pDE22中．用BamHⅠ／HindⅢ双酶切pDE22得到复合多表位基因CtEm，再将CtEm亚克隆入真核表达载体pCDNA3，1（-），构建重组质粒pCDNA3．1（-）-CtEm，经酶切鉴定及测序正确后，通过脂质体转染至P815细胞，持续G418压力选择和有限稀释法克隆化获得稳定转染的细胞系，用RT—PCR，IFA，Western—blot证实该稳定转染细胞系可以表达多表位基因．结果：构建了真核表达载体pcDNA3．1（-）-CtEm，建立了稳定转染的P815细胞系．结论：构建HCV多表位基因的真核表达载体，稳定转染P815细胞，为进一步在疫苗研究中分析CTL功能建立了靶细胞．
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 表位 真核表达 转染 |
| 文章编号： | 1000-2790(2006)01-0038-04 |
| 收稿时间： | 2005-05-16 |
| 修稿时间： | 2005-06-23 |
Establishment of stably transfected P815 cell line expressing multi-epitope gene of hepatitis C virus |
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| WEI San-Hua,YIN Wen,LEI Ying-Feng,HU Xing-Bin,YANG Jing,L Xin,SUN Meng-Ning,XU Zhi-Kai.Establishment of stably transfected P815 cell line expressing multi-epitope gene of hepatitis C virus[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2006,27(1):38-41. |
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| Authors: | WEI San-Hua YIN Wen LEI Ying-Feng HU Xing-Bin YANG Jing L Xin SUN Meng-Ning XU Zhi-Kai |
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| Institution: | WEI San-Hua,YIN Wen,LEI Ying-Feng,HU Xing-Bin,YANG Jing,L(U) Xin,SUN Meng-Ning,XU Zhi-Kai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis C virus epitope eukaryotic expression transfection |
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