siRNA技术对哮喘模型大鼠气道细胞表达TGF-β和ET-1的影响

目的观察siRNA技术对哮喘大鼠转化生长因子-β(TGF-β)的作用和对内皮素(ET-1)的影响,探讨使用该技术阻断TGF-β表达治疗哮喘的方法。方法采用卵白蛋白致敏的方法复制大鼠哮喘模型,原代培养大鼠的支气管平滑肌细胞,然后使用TGF-β干扰RNA作用于哮喘平滑肌细胞,用PCR方法和Western blot方法检测正常组平滑肌细胞(A组)、哮喘组平滑肌细胞(B组)以及TGF-β小干扰RNA作用后的哮喘组平滑肌细胞(C组)中TGF-β和ET-1的表达情况,并用MTT方法检测不同组细胞的增殖活性。结果哮喘组与正常组相比,肺部组织具有炎症细胞浸润,基底膜增厚明显,褶皱增多,具有明显的哮喘症状。三组细胞中TGF-β和ET-1表达情况的PCR和Western blot结果,C组TGF-β和ET-1的表达量明显低于B组。MTT结果显示,转染48 h后,C组和B组增殖抑制率分别为(72.1±1.1)%和(55.6±1.5)%;转染72 h后,分别为(42.0±1.3)%和(21.4±1.7)%,C组与B组相比差异显著(P<0.05)。结论使用siRNA技术阻断TGF-β的表达可降低哮喘组细胞ET-1的表达,进而抑制细胞增殖,达到治疗哮喘的目的。