| 糖尿病并发症相关基因醛糖还原酶酵母细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 刘静,叶玲,刘建伟. 糖尿病并发症相关基因醛糖还原酶酵母细胞模型的建立[J]. 中国老年学杂志, 2005, 25(11): 1367-1369 |
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| 作者姓名： | 刘静 叶玲 刘建伟 |
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| 作者单位： | 解放军总医院老年医学研究所,北京,100853 |
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| 摘 要： | 目的 构建由绿色荧光蛋白（GFP）标记的糖尿病慢性并发症相关基因醛糖还原酶（AR）表达载体，并在酵母细胞中表达，建立AR抑制剂筛选模型。方法 构建AR与GFP的嵌合基因，将此AR：：GFP嵌合基因克隆到酵母表达载体pYEX-BX中，再将重组载体pYEX-BX-AR：：GFP转化至酵母宿主菌INVSC1，在SC-UD选择性培养基中表达AR：：GFP。结果 PCR扩增出约l106bp大小片段，为AR基因片段；RT-PCR在酵母细胞中检测到ARmRNA的表达；经CuS04诱导后可见AR：：GFP融合蛋白的绿色荧光；诱导剂CuSO4终浓度在100～200μmol／L范围内相对荧光强度较高，细胞密度适中；培养基SC-UD的pH值为6左右最适合细胞生长和荧光表达。结论 AR：：GFP在酿酒酵母中成功地表达，酵母细胞是研究目的基因功能与表达的良好模式菌。
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| 关 键 词： | 醛糖还原酶 酵母 绿色荧光蛋白 基因表达 克隆 |
| 文章编号： | 1005-9202（2005）11-1367-03 |
| 收稿时间： | 2005-06-10 |
| 修稿时间： | 2005-09-12 |
To construct the expression model of related gene of diabetic complication aldose reductase in Saccharomyces cerevisiae cells |
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| LIU Jing,YE Ling,LIU Jian-Wei. To construct the expression model of related gene of diabetic complication aldose reductase in Saccharomyces cerevisiae cells[J]. Chinese Journal of Gerontology, 2005, 25(11): 1367-1369 |
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| Authors: | LIU Jing YE Ling LIU Jian-Wei |
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| Affiliation: | Institute of Geriatrics, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aldose reductase Yeast Green fluorescent protein(GFP) Gene expression Clone |
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