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| 骨髓间质干细胞绿色荧光蛋白基因的转染和克隆化研究 | |
| 引用本文： | 钱晖,许文荣,胡嘉波,陈永昌,孙晓春,朱伟,韩崇旭,张锡然. 骨髓间质干细胞绿色荧光蛋白基因的转染和克隆化研究[J]. 临床检验杂志, 2003, 21(5): 267-269 |
| 作者姓名： | 钱晖 许文荣 胡嘉波 陈永昌 孙晓春 朱伟 韩崇旭 张锡然 |
| 作者单位： | 1. 江苏大学医学技术学院,江苏镇江,212001 2. 江苏大学医学技术学院,江苏镇江,212001;南京师范大学生命科学院,南京,210097 3. 南京师范大学生命科学院,南京,210097 |
| 基金项目： | 江苏省自然科学基金项目 (BK2 0 0 2 0 0 6)，江苏省高校自然科学基金项目 (0 2KJB3 10 0 0 2 ) |
| 摘 要： | 目的 建立能稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)并连续传代培养的骨髓间质干细胞(MSCs)株。方法 采用电穿孔法将带有GFP的质粒(pGFP-N1)在不同条件下转染MSCs，经过G418筛选，有限稀释法筛选阳性克隆，荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达情况。结果 电穿孔以电容量1050μF、电压260V时效果最好，转染GFP的MSCs能在含有G418的培养基中生长，未转染的骨髓间质干细胞不断死亡。转染24h后即能观察到少量荧光细胞，一个月后大部分荧光细胞呈集落样生长，荧光表达较强，转染率为50％-60％。体外克隆后，能稳定表达至10代，10代后荧光强度明显减弱。结论 GFP基因能在MSCs中进行有效的复制、转录和翻译，并可持续、稳定、高效表达；转染GFP的MSCs能作为研究MSCs的诱导分化及生物细胞工程治疗的载体细胞。 |
| 关 键 词： | 骨髓间质干细胞 绿色荧光蛋白 基因转染 基因克隆 质粒 |
| 文章编号： | 1001-764X(2003)05-0267-03 |
| 修稿时间： | 2003-03-19 |
Transfection by the green fluorescent protein gene and cloning culture in mesenchymal stem cells derived from rat bone marrow |
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| QIAN Hui,XU Wenrong,HU Jiabo,et al.. Transfection by the green fluorescent protein gene and cloning culture in mesenchymal stem cells derived from rat bone marrow[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2003, 21(5): 267-269 | |
| Authors: | QIAN Hui XU Wenrong HU Jiabo et al. |
| Abstract: | |
| Keywords: | green fluorescent protein transfection mesenchymal stem cells |
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