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| 壳聚糖介导真核双表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 | |
| 引用本文： | 李树宝,潘锋,白欣,王帮河,丁浩,汪春兰,何金生,张梅,赵宇. 壳聚糖介导真核双表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2009, 13(1) |
| 作者姓名： | 李树宝 潘锋 白欣 王帮河 丁浩 汪春兰 何金生 张梅 赵宇 |
| 作者单位： | 1. 安徽医科大学第一附属医院整形外科,安徽省合肥市,230032 2. 中国医科大学解剖教研室,辽宁省沈阳市,110001 3. 安徽医科大学免疫教研室,安徽省合肥市,230032 |
| 基金项目： | 安徽省自然科学基金面上项目 |
| 摘 要： | 背景:发展一种安全有效的方法来促进骨缺损是修复重建外科面临的重要问题,自体骨移植仍是目前优先考虑的选择,但供区有限且不可避免地对供区造成新的损害;同种异体骨移植存在免疫排斥反应;非骨性材料移植物在临床实践中的并发症仍居高小下.目的:探讨壳聚糖介导真核双表达质粒pIRES-hVEGF121cDNNhBMP-4转染兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的可行性.设计、时间及地点:细胞基因工程学体外实验,于2007-09/2008 04在安徽医科大学与中国医科大学完成.材料:清洁级新西兰大白兔8只,南安徽医科大学实验动物中心提供.壳聚糖介导的真核双表达质粒pIRES-hVEGF121cDNNhBMP-4为课题组自行构建.方法:无菌条件下抽取兔骨髓,Percoll法体外分离培养骨髓间充质干细胞,通过换液和贴壁吹打法进行纯化扩增.第3代骨髓间充质干细胞80%融合后,按1×108L1密度接种,实验组采用壳聚糖介导的真核双表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4进行转染,对照组不转染质粒,继续以含10%FBS的L-DMEM普通培养基进行培养21 d.主要观察指标:碱性磷酸酶及茜素红染色检测细胞分化情况,扫描电镜观察细胞结构变化.结果:转染14 d后实验组碱性磷酸酶染色呈强阳性表达,茜素红染色出现大量棕红色的钙结节,电镜观察细胞内含有大量碱性磷酸酶的小泡,细胞周围大量基质分泌;对照组碱性磷酸酶与茜素红染色均呈阴性,电镜干细胞内几乎没有含碱性磷酸酶的小泡.结论:兔骨髓间充质干细胞在体外经壳聚糖介导的真核双表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染后,可定向分化为成骨细胞. |
| 关 键 词： | 骨髓间充质干细胞 成骨 壳聚糖 骨形成蛋白 血管内皮生长因子 |
Differentiation of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells into osteoplasts with the transfection of the chitosan bearing pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4 |
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| Li Shu-bao,Pan Feng,Bai Xin,Wang Bang-he,Ding Hao,Wang Chun-lan,He Jin-sheng,Zhang Mei,Zhao Yu. Differentiation of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells into osteoplasts with the transfection of the chitosan bearing pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2009, 13(1) | |
| Authors: | Li Shu-bao Pan Feng Bai Xin Wang Bang-he Ding Hao Wang Chun-lan He Jin-sheng Zhang Mei Zhao Yu |
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| Keywords: | |
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