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pHsa-m122真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定
引用本文:陈姗姗,余冰,倪明,吕婷婷,张小勇,江敏,陆蒙吉. pHsa-m122真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定[J]. 热带医学杂志, 2008, 8(4): 295-299
作者姓名:陈姗姗  余冰  倪明  吕婷婷  张小勇  江敏  陆蒙吉
作者单位:华中科技大学同济医学院病原生物学系,武汉,430030;华中科技大学同济医院感染科,武汉,430030
基金项目:湖北省自然科学基金 , 华中科技大学同济医学院院基金
摘    要:目的 构建肝脏特异性的微RNA-miR-122真核细胞表达载体并对其表达活性进行鉴定.方法 经PCR从人基因组DNA中扩增肝脏特异性的微RNA-miR-122的前体序列,引入酶切位点和Poly T转录终止序列,将其插入siRNA专用真核表达载体pSuper中.将构建载体进行酶切、测序鉴定,再通过共转染含miR-122靶序列的GFP表达质粒后,经荧光显微镜和流式细胞仪及Western Blot检测,鉴定载体功能性表达.结果 miR-122的前体序列成功地克隆到真核表达载体pSuper上.且可表达出具有生物活性的miR-122,将该真核表达载体命名为pHsa-m122.结论 成功构建miR-122真核表达载体pHsa-m122,有助于进一步研究miR-122在肝炎病毒复制及肝癌形成中的作用.

关 键 词:载体构建  微RNA  miR-122  pSuper
文章编号:1672-3619(2008)04-0295-04
修稿时间:2007-12-22

Construction of pHsa-m122 Expression Vector and Determination of Its Expression Activity
CHEN Shan-shan,YU Bing,NI Ming,Lü Ting-ting,ZHANG Xiao-yong,JIANG Ming,LU Meng-ji. Construction of pHsa-m122 Expression Vector and Determination of Its Expression Activity[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2008, 8(4): 295-299
Authors:CHEN Shan-shan  YU Bing  NI Ming  Lü Ting-ting  ZHANG Xiao-yong  JIANG Ming  LU Meng-ji
Abstract:
Keywords:
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