| BrdU作为脂肪干细胞标记示踪法的可行性 |
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| 引用本文： | 顾广祥,施晓雷,杭化莲,丁义涛. BrdU作为脂肪干细胞标记示踪法的可行性[J]. 世界华人消化杂志, 2010, 18(1) |
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| 作者姓名： | 顾广祥 施晓雷 杭化莲 丁义涛 |
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| 作者单位： | 1. 南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科,江苏省南京市,210008
2. 南京大学附属鼓楼医院肝胆外科,江苏省南京市,210008 |
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| 摘 要： | 目的:研究BrdU标记猪脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的最佳剂量及时间,探讨其作为干细胞标记示踪方法的可行性.方法:自中华实验猪背部提取脂肪组织,采用贴壁法分离培养ADSCs,取第3代细胞以终浓度分别为10、15、20、25及30 μmol/L BrdU进行标记:另一孔不含BrdU作为对照组,分别培养12、24、48、72及96 h.免疫荧光法检测各组细胞BrdU标记率,找出BrdU的最佳标记方法,通过台盼蓝排斥试验、MTT及细胞凋亡检测,观察BrdU对ADSCs生长情况的影响.对第3代的ADSCs采用最佳标记方法后更换普通培养基继续培养,适时传代,连续检测第4、5、6、7、8代ADSCs的BrdU标记率.结果:原代培养的ADSCs的形态主要为长梭形,第3代ADSCs经BrdU标记后胞核呈红色荧光,随浓度的升高及时间的延长,BrdU阳性标记率逐渐升高,以终浓度20μmol/L BrdU标记48 h后阳性率达90%以上,且连续传5代标记率仍达40%.MTT、台盼蓝排斥试验及细胞凋亡检测发现BrdU对ADSCs生长增殖基本无影响.结论:BrdU标记ADSCs的最佳剂量和时间为20 μmol/L和48 h,该方法标记率高,对细胞影响小,可用于动态研究ADSCs在移植体内生长、分化.
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| 关 键 词： | 脂肪干细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 标记 |
Bromodeoxyuridine labeling of swine adipose-derived stem cells in vitro |
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| Guang-Xiang Gu,Xiao-Lei Shi,Hua-Lian Hang,Yi-Tao Ding. Bromodeoxyuridine labeling of swine adipose-derived stem cells in vitro[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2010, 18(1) |
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| Authors: | Guang-Xiang Gu Xiao-Lei Shi Hua-Lian Hang Yi-Tao Ding |
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| Affiliation: | Guang-Xiang Gu,Yi-Tao Ding,Department of Hepatobiliary Surgery,Drum Tower Clinical Medical College of Nanjing Medical University,Nanjing 210008,Jiangsu Province,China Xiao-Lei Shi,Hua-Lian Hang,the Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adipose-derived stem cells Bromodeoxyuridine Labeling |
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