摘 要: | 目的:构建人微小病毒B19 VP1基因的原核高效表达系统。方法:通过PCR扩增B19病毒主要抗原决定簇VP1区段基因,将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,IPTG诱导表达融合蛋白,产物经亲和层析初步纯化,以Western-Blot进行鉴定,并包被ELISA板,对临床血清进行检测。结果:pGEX-4T-2-VP1可在大肠杆菌中高效表达,表达产物经纯化后可得单一目的蛋白条带。ELISA结果表明,其灵敏度、特异度等指标与德国Virion试剂盒有较好的符合率。结论:该重组蛋白具有良好的抗原性,为研制和开发具有我国独立知识产权的B19病毒基因工程抗原ELISA诊断试剂盒提供了有价值的资料。
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