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人SLPI启动子调控下eGFP基因表达载体的构建与表达
引用本文:杜晓媛,张桂珍,杜珍武,杨绍娟,卜莉莎. 人SLPI启动子调控下eGFP基因表达载体的构建与表达[J]. 中国实验诊断学, 2006, 10(2): 115-117,F0003
作者姓名:杜晓媛  张桂珍  杜珍武  杨绍娟  卜莉莎
作者单位:吉林大学中日联谊医院中心研究室,吉林,长春,130033
摘    要:目的构建SLPI基因启动子驱动下EGFP表达载体并验证该启动子在非小细胞肺癌细胞株中的特异调控活性。方法通过PCR方法从人外周血基因组中扩增SLPI启动子,经序列分析后,利用peDNA3.1(+)和pEGFP构建SLPI启动子调控下EGFP表达载体,以脂质体介导转染入人宫颈上皮癌Hela、肺腺癌A549、SPC-A1和肝细胞癌HepG2细胞中,经G418稳定筛选后,在荧光显微镜下观察该启动子在非小细胞肺癌细胞株中的特异调控EGFP表达的活性。结果克隆出的SLPI启动子序列与Genebank上SLPI基因上游5’末端转录调控区的序列完全一致,稳定转染的细胞株Hela、A549、SPC—A1和HepG2中,CMV启动子控制下的EGFP基因均有表达,发出绿色荧光;而SLPI启动子词控下的EGFP基因在Hela、A549和SPC-A1中有表达,发出绿色荧光,在HepG2中则未见荧光发出。结论钓取的人SLPI启动子在非小细胞肺癌细胞中具有特异调控其下游基因表达的活性,为探索该启动子调控下的抗肺癌基因治疗提供实验基础。

关 键 词:肺癌  分泌型白细胞蛋白酶抑制剂基因  启动子  基因治疗  加强型绿色荧光蛋白
文章编号:1007-4287(2006)02-0015-03
收稿时间:2005-04-01
修稿时间:2005-04-01

Constuction and expression of enhanced green fluorescence protein report gene vectorunder the control of human secretory leukoprotease inhibitor gene promoter
DU Xiao-yuan, ZHANG Gui-zhi, DU Zhen-wu,et al.. Constuction and expression of enhanced green fluorescence protein report gene vectorunder the control of human secretory leukoprotease inhibitor gene promoter[J]. Chinese Journal of Laboratory Diagnosis, 2006, 10(2): 115-117,F0003
Authors:DU Xiao-yuan   ZHANG Gui-zhi   DU Zhen-wu  et al.
Affiliation:DU Xiao-yuan, ZHANG Gui-zhi, DU Zhen-wu, et al.
Abstract:
Keywords:lung cancer   secretory leukoprotease inhibitor gene   promoter   gene therapy    EG FP
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