| CFSE标记结合流式细胞术在研究NK细胞分裂与杀伤功能中的应用 |
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| 引用本文： | 范艳莹,吴长有. CFSE标记结合流式细胞术在研究NK细胞分裂与杀伤功能中的应用[J]. 免疫学杂志, 2010, 26(1): 63-67 |
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| 作者姓名： | 范艳莹 吴长有 |
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| 作者单位： | 中山大学中山医学院免疫学教研室热带病防治研究教育部重点实验室,广州,510080;中山大学中山医学院免疫学教研室热带病防治研究教育部重点实验室,广州,510080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30671898);;教育部博士学科点专项科研基金(20070558213);;广东省自然科学基金博士启动项目(8451008901000131);;广东省医学科研基金(A2009161) |
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| 摘 要： | 目的建立并优化CFSE标记结合流式细胞术检测人NK细胞分裂、增殖和杀伤功能的方法。方法利用CFSE标记磁珠纯化的人NK细胞,加或不加IL-2进行培养。分别在第3、5、7天收集细胞,流式细胞术对NK细胞的分裂增殖进行检测;利用IL-2活化NK细胞作为效应细胞,与靶细胞(K562细胞)按不同效靶比在37℃5%CO_2培养箱共孵育4 h加入碘化丙啶(PI),流式细胞术检测CFSE~+PI~+K562细胞(死亡的靶细胞)的百分率。结果CFSE标记的NK细胞在IL-2的作用下第5天即可观察到细胞增殖,至第7天80%以上的NK细胞均发生增殖,分裂1～6次。在对NK细胞杀伤功能的研究中,发现IL-2刺激后NK细胞的杀伤功显著增强。此外,当IL-2或IL-12活化的NK细胞作用于不同的靶细胞时,均可有效地杀伤靶细胞。结论以CFSE标记技术结合流式细胞术可在单细胞水平客观精确地对NK细胞的增殖、分裂和杀伤功能进行分析。本方法灵敏度高、操作简便易行、重复性好,对其他淋巴细胞亚群功能的研究具有重要的借鉴意义。
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| 关 键 词： | CFSE NK细胞 细胞分裂 杀伤功能 |
Establishment of CFSE labeling method coupling with flow cytometry used in the study of human NK cell function |
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| FAN Yanying,WU Changyou. Establishment of CFSE labeling method coupling with flow cytometry used in the study of human NK cell function[J]. Immunological Journal, 2010, 26(1): 63-67 |
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| Authors: | FAN Yanying WU Changyou |
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| Affiliation: | FAN Yanying,WU Changyou Department of Immunology,Zhongshan School of Medicine,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CFSE NK cells Cell division Cytolytic activity |
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