| 细胞因子实时定量PCR检测方法的建立和应用 |
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| 引用本文： | 赵进良,赵彦平,汤俊明,谈永飞,樊一笋,张学光. 细胞因子实时定量PCR检测方法的建立和应用[J]. 江苏医药, 2007, 33(5): 486-488 |
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| 作者姓名： | 赵进良 赵彦平 汤俊明 谈永飞 樊一笋 张学光 |
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| 作者单位： | 214200,宜兴市人民医院;苏州大学医学生物技术研究所 |
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| 基金项目： | 江苏大学临床医学技术发展基金 |
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| 摘 要： | 目的 建立细胞因子mRNA实时定量PCR的检测方法,并探讨人单个核细胞(PBMC)在激发型CD3单克隆抗体作用下,细胞因子mRNA的表达.方法 分离健康个体的PBMC,体外与激发型CD3单克隆抗体共培养,应用实时定量PCR检测不同共培养时间点Th1型(IL-2,IFN-γ)和Th2型(IL-10)细胞因子mRNA的表达.结果 激发型CD3抗体能显著上调PBMC胞浆IL-2,IFN-γ和IL-10 mRNA的表达.在共培养的12 h,IL-2 mRNA的含量显著上升并达到峰值14 000 copies/ml,随着培养时间的延长快速下降.IFN-γ和IL-10 mRNA在共培养的24～48 h达到峰值,分别为110 000 copies/ml和15 000 copies/ml.不同细胞因子其胞浆mRNA水平的基础值有明显差异.结论 实时定量PCR能在基因转录水平敏感和特异地反映微量生物活性因子的表达和调节.因此,该技术在基础和临床免疫研究中,具有良好的应用价值.
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| 关 键 词： | 实时定量PCR 细胞因子 CD3单克隆抗体 |
| 文章编号： | 0253-3685(2007)05-0486-03 |
| 修稿时间： | 2007-01-23 |
Quantification of cytokine mRNA in human peripheral blood mononuclear cells by real-time PCR |
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| ZHAO Jinliang,ZHAO Yanping, TANG Junming,et al.. Quantification of cytokine mRNA in human peripheral blood mononuclear cells by real-time PCR[J]. Jiangsu Medical Journal, 2007, 33(5): 486-488 |
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| Authors: | ZHAO Jinliang ZHAO Yanping TANG Junming et al. |
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| Affiliation: | ZHAO Jinliang,ZHAO Yanping, TANG Junming, et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Real-time PCR Cytokine CD3 mAb |
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