| 腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 张正,刘丹平,蒲勤,郭韬,张男.腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1的构建和鉴定[J].辽宁医学院学报,2005,26(3):1-5. |
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| 作者姓名： | 张正 刘丹平 蒲勤 郭韬 张男 |
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| 作者单位： | 锦州医学院附属第一医院骨科,辽宁,锦州,121000;第四军医大学生化教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然基金资助项目(编号:30070757). |
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| 摘 要： | 目的 构建腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2^ -IRES-hrGFP-1，为构建表达具有抗原表位标记的骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2，BMP-2)，并同时表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础。方法 对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存在的限制性内切酶识别位点进行分析，利用PCR(polymeras chain reaction，PCR)技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因突变，以去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点Xho Ⅰ。测序检测突变情况，将突变后的BMP2基因(BMP2^ 基因)定向连入腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV-IRES-hrGFP-1，通过限制性内切酶酶切图谱分析鉴定获得的重组质粒。结果 重组质粒经双酶切鉴定图谱正确。结论 成功构建了pShuttle CMV-BMP2^ -IRES-hrGFP-1。
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| 关 键 词： | 腺病毒穿梭载体 骨形态发生蛋白2(BMP-2) |
| 文章编号： | 1000-5161(2005)03-0001-05 |
| 修稿时间： | 2005年1月12日 |
Construction and Identification of Recombinant Adenovirus Shuttle Plasimid pShuttle CMV-BMP2 +-IRES-GFP-1 |
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| ZHANG Zheng,LIU Dan-ping,PU Qin,GUO Tao,ZHANG Nan.Construction and Identification of Recombinant Adenovirus Shuttle Plasimid pShuttle CMV-BMP2 +-IRES-GFP-1[J].Journal of Liaoning Medical University (LNMU) Bimonthly,2005,26(3):1-5. |
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| Authors: | ZHANG Zheng LIU Dan-ping PU Qin GUO Tao ZHANG Nan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adenovirus shuttle plasmid bone morphogenetic protein 2 ( BMP-2) |
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