| 人源性抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定 |
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| 引用本文： | 任向荣,熊盛,唐永红,粟宽源,陈文吟,郑业华,余宙耀. 人源性抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定[J]. 中国免疫学杂志, 2002, 18(12): 824-827 |
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| 作者姓名： | 任向荣 熊盛 唐永红 粟宽源 陈文吟 郑业华 余宙耀 |
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| 作者单位： | 1. 解放军第458医院全军传染病中心,广州,510602
2. 华南理工大学生物工程系,广州,510640 |
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| 基金项目： | 广州市科委重点攻关项目 ( 97- z -6 5- 0 5 ) |
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| 摘 要： | 目的 :制备有活性的人源性抗HBsAg单链抗体。方法 :应用噬菌体表面呈现技术获得人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体的Fab片段 ,并将VH 和VL 基因以 (Gly4Ser) 3linker连接成单链 ,插入表达载体pQE40 ,筛选大肠杆菌高表达菌株。结果 :工程菌表达优化试验表明 ,在OD6 0 0 为 0 6时开始诱导 ,持续 6h ,目的蛋白表达量最高可达菌体总蛋白的 31%。包涵体变性后上样镍离子螯合层析柱一步纯化 ,收集目的峰 ,透析复性 ,得纯度为 97%的重组单链抗体 ,其亲和常数为 0 2 3× 10 8mol L。结论 :抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌内获得高效表达 ,经变性和复性 ,得到有活性的单链抗体 ,氨基酸组成正确。为进行临床前研究打下基础。
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| 关 键 词： | 噬菌体表面呈现 乙型肝炎表面抗原 单链抗体 表达 复性 生物活性 |
| 文章编号： | 1000-484X(2002)12-0824-04 |
Expression and bioactivity of a human single-chain Fv antibody against the HBsAg |
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| REN Xiang-Rong,XIONG Sheng,TANG Yong-Hong et al.Genter of Infectious Diseases. Expression and bioactivity of a human single-chain Fv antibody against the HBsAg[J]. Chinese Journal of Immunology, 2002, 18(12): 824-827 |
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| Authors: | REN Xiang-Rong XIONG Sheng TANG Yong-Hong et al.Genter of Infectious Diseases |
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| Affiliation: | REN Xiang-Rong,XIONG Sheng*,TANG Yong-Hong et al.Genter of Infectious Diseases,the 458th Hospital of PLA,Guangzhou 510602.*Department Biotechnology,South China University of Technology,Guangzhou 510640 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phage display HBsAg Single-chain Fv antiobdy Expression Refolding Bioactivity |
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