| 用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力 |
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| 引用本文： | 蒋黎华,史桂英,石学耕,范丽安. 用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2003, 23(12): 982-984 |
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| 作者姓名： | 蒋黎华 史桂英 石学耕 范丽安 |
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| 作者单位： | 1. 上海第二医科大学,上海市免疫学研究所
2. 上海第二医科大学,细胞生物学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 980 0 13 1) |
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| 摘 要： | 目的：建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法，并评估其实用性。方法：pH2．7～3．1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后，即用IMDM培养液中和pH，然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的9肽及竞争肽共同孵育，FACs检测细胞表面的平均荧光强度，以达到50％抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标。结果：通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加β2微球蛋白和，或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度，对方法进行评估，结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小。结论：在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后，本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究。
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| 关 键 词： | 竞争结合法 检测 HLAⅠ类分子抗原 呈递能力 |
| 修稿时间： | 2003-07-27 |
An useful method to analysis MHC class Ⅰ peptide binding |
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| JIANG Li-hua ,SHI Gui-ying,SHI Xue-geng,FAN Li-an. An useful method to analysis MHC class Ⅰ peptide binding[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2003, 23(12): 982-984 |
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| Authors: | JIANG Li-hua SHI Gui-ying SHI Xue-geng FAN Li-an |
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| Affiliation: | JIANG Li-hua *,SHI Gui-ying,SHI Xue-geng,FAN Li-an. *Shanghai Institute of Immunology,Shanghai Second Medical University,Shanghai 200025,China |
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