忽地笑加兰他敏生物合成代谢途径中COMT酶基因克隆及序列分析

目的克隆忽地笑加兰他敏合成代谢途径中COMT酶基因及序列分析。方法通过比较数据库中四种植物烟草、唐松草、玉米和罂粟的儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因的同源序列,设计简并引物,克隆出忽地笑COMT酶基因（LaCOMT）的部分序列,然后通过RACE技术获得LaCOMT的全长序列。结果该序列开放读码框长度为1101bp,编码366个氨基酸,且此氨基酸序列具有依赖S-腺苷-L-甲硫胺酸（SAM）的甲基转移酶蛋白的三个保守序列,并与高等植物COMT氨基酸序列（CAA52462.1、AAQ01670.1、AAD29844.1和NP₀01106047.1）的同源性大于74%。LaCOMT蛋白的预测分子量为40 501.9,等电点pI为5.95。结论此研究所获得的碱基序列为COMT酶基因的全长序列,且其预测的三级结构与咖啡酸-3-氧位甲基转移酶单体三级结构的1kyzE模型相似,均为依赖S-腺苷-L-甲硫胺酸（SAM）的甲基转移酶。