| 人禽流感HSN1病毒HA1蛋白抗原表位及主要免疫功能区特征的研究 |
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| 引用本文： | 夏玉坤,刘伯华,杨保安,李靖,张永国,车小燕,祝庆余.人禽流感HSN1病毒HA1蛋白抗原表位及主要免疫功能区特征的研究[J].解放军医学杂志,2009,34(6). |
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| 作者姓名： | 夏玉坤 刘伯华 杨保安 李靖 张永国 车小燕 祝庆余 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
2. 南方医科大学珠江医院临床基础研究所 |
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| 摘 要： | 目的 确定人禽流感H5N1病毒HA1蛋白的单克隆抗体(McAb)抗识别表位及主要免疫功能区.方法 将16条人禽流感H5N1病毒HA1基因重叠片段克隆入真核表达载体pDisplay,构建表达HA1蛋白的重叠肽段重组质粒,转染HeLa细胞后制备细胞抗原片.利用灭活的H5N1病毒免疫BALB/C小鼠,制备病毒特异单克隆抗体(单抗)和多克隆抗体(多抗),采用间接免疫荧光法分析单抗、多抗与HA1肽段的反应性.确定HA1蛋白的单抗识别表位及主要免疫功能区.结果 成功克隆、表达了16条不同长度的H5N1肽段,并制备、获得30株分泌抗H5N1型禽流感病毒McAb的杂交瘤细胞株,其中18株为抗HA的单抗,18株中有6株单抗具有中和病毒活性.利用表达的H5N1肽段对单抗识别表位进行分析,初步确定3B5、3D1、3132、M6、M3等18株McAb识别表位区域分别位于氨基酸残基aa133-143、aa155-165、aa166-196、aa166-176、aa34-66及aa296-328之间,其中3B5、3D1、3B2、M6等McAb识别表位为序列依赖型表位,M3和M7等具有中和活性的McAb识别表位为构象性中和表位.结论 利用制备的H5N1病毒特异性McAb和表达的病毒HA1蛋白重叠肽抗原,初步确定了18株抗HA McAb的识别表位和HA1蛋白的主要免疫功能区,为进一步研究开发新型疫苗提供了重要理论依据.
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| 关 键 词： | 流感病毒A型 H5N1亚型 血凝素糖蛋白类 流感病毒 表位 |
Location of antigenic epitopes and major immunodominant region on the hemagglutinin of human H5N1 avian influenza virus |
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| XIA Yu-kun,LIU Bo-hua,YANG Bao-an,LI Jing,ZHANG Yong-guo,CHE Xiao-yan,ZHU Qing-yu.Location of antigenic epitopes and major immunodominant region on the hemagglutinin of human H5N1 avian influenza virus[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2009,34(6). |
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| Authors: | XIA Yu-kun LIU Bo-hua YANG Bao-an LI Jing ZHANG Yong-guo CHE Xiao-yan ZHU Qing-yu |
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