| 逆病毒载体介导的双耐药基因在小鼠骨髓细胞的转移 |
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| 引用本文： | 周鑫莉,王季石,顾静文,林果为.逆病毒载体介导的双耐药基因在小鼠骨髓细胞的转移[J].复旦学报(医学版),2002,29(1):1-5. |
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| 作者姓名： | 周鑫莉 王季石 顾静文 林果为 |
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| 作者单位： | 复旦大学附属华山医院血液科,上海,200040 |
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| 摘 要： | 目的 增强造血细胞对化疗药物的耐受性 ,探讨逆转录病毒介导的基因转移效率及耐药基因导入在造血细胞保护性基因治疗中的作用。方法 应用电穿孔基因转移法将逆转录病毒载体G1Na MGMT IRES MDR1导入病毒包装细胞GP E86及PA3 17,以VCR加压筛选后的阳性克隆上清感染小鼠骨髓细胞 ,应用PCR、Southernblot及流式细胞仪检测耐药基因MGMT及MDR1在细胞中的转移与表达。结果 加压筛选及乒乓效应使病毒滴度由 ( 0 .2～ 7.6)× 10 4CFU/mL提高到 ( 1.9～ 5 .7)× 10 6 CFU/mL ,从DNA、RNA及蛋白水平上分别证实了双耐药基因在小鼠骨髓细胞中获得了有效转移和表达 ,而转基因后的小鼠骨髓细胞对VCR、高三尖杉酯碱和BCNU的耐药性比未转导细胞分别提高了 5 .7、5 .0和 8.5倍。结论 双耐药基因成功导入小鼠骨髓细胞为肿瘤基因治疗的临床研究提供了实验基础。
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| 关 键 词： | 逆转录病毒载体 耐药基因 六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶 多药耐药基因 基因转移 骨髓细胞 |
| 修稿时间： | 2001年6月8日 |
Retroviral Vector Mediated Double Drug Resistance Genes Transfer of Murine Bone Marrow Cells |
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| ZHOU Xin li,WANG Ji shi,GU Jin wen,LIN Guo wei.Retroviral Vector Mediated Double Drug Resistance Genes Transfer of Murine Bone Marrow Cells[J].Fudan University Journal of Medical Sciences,2002,29(1):1-5. |
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| Authors: | ZHOU Xin li WANG Ji shi GU Jin wen LIN Guo wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | retroviral vector drug resistance gene 06 methylguanine DNA methyltransferase multidrug resistance gene transfer bone marrow cells |
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