M1型巨噬细胞极化在内皮细胞转分化及慢性移植肾失功中的作用 |
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作者姓名: | 张 翔 王子杰 郑 明 韩前广 黄正楷 易小敏 陶 俊 韩志坚 谭若芸 居小兵 顾 民 |
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作者单位: | 南京医科大学第一附属医院泌尿外科,江苏 南京 210029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81900684,81870512);江苏省自然科学基金青年基金(BK20191063) |
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摘 要: | 目的:探究M1型巨噬细胞极化在内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelium?to?myofibroblast transition,EndMT)及慢性肾移植失功(chronic allograft dysfunction,CAD)中的作用。方法:从GEO公共数据库中下载GSE21374转录组测序数据,并使用Cibersort软件分析CAD患者移植肾中的免疫细胞的浸润状态。收集本中心CAD患者的移植肾切除标本,使用免疫荧光、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹法(Western blot,WB)等方法观察M1型巨噬细胞在移植肾组织中的浸润情况。体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和干扰素?γ(interferon?γ,IFN?γ)诱导Raw264.7巨噬细胞向M1极化。Transwell小室构建M1型巨噬细胞和主动脉内皮细胞的共培养模型。使用PCR、WB和细胞免疫荧光观察共培养模型中内皮细胞的CD31与α?SMA的表达情况。结果:基于GEO公共数据库,发现单核?巨噬细胞明显浸润于CAD移植肾组织中(P<0.05);在本中心的CAD患者移植肾标本中,CD68(+)iNOS(+)M1型巨噬细胞亦明显浸润于肾小球及间质中,且M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA表达量明显增加(P<0.05)。在细胞共培养模型中发现,M1型巨噬细胞可明显促进内皮细胞发生EndMT过程。结论:M1型巨噬细胞明显浸润于CAD患者的移植肾组织中,并可能通过诱导内皮细胞发生EndMT促进CAD的进展。
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关 键 词: | 巨噬细胞极化;内皮细胞向间充质细胞转分化;慢性移植肾失功;肾脏移植 |
收稿时间: | 2020-12-19 |
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