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Lenti-TK介导间充质干细胞对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用
引用本文:李冠雪,申聪香,文忠,钟品能,杨柯柯,张沈华.Lenti-TK介导间充质干细胞对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2013,20(2):145-152.
作者姓名:李冠雪  申聪香  文忠  钟品能  杨柯柯  张沈华
作者单位:南方医科大学 珠江医院 耳鼻咽喉-头颈外科,广东 广州 510282;南方医科大学 珠江医院 耳鼻咽喉-头颈外科,广东 广州 510282;南方医科大学 珠江医院 耳鼻咽喉-头颈外科,广东 广州 510282;南方医科大学 珠江医院 耳鼻咽喉-头颈外科,广东 广州 510282;南方医科大学 珠江医院 耳鼻咽喉-头颈外科,广东 广州 510282;南方医科大学 珠江医院 耳鼻咽喉-头颈外科,广东 广州 510282
基金项目:广东省科技计划资助项目(No. 2010B031200009)
摘    要:目的: 观察慢病毒-胸苷激酶(lentivirus-thymidine kinase,Lenti-TK)/间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用。 方法: 构建包含TK基因的重组慢病毒表达载体Lenti-TK,感染MSC后得到Lenti-TK-MSC,RT-PCR及Western blotting检测Lenti-TK-MSC中HA-TK的表达。免疫磁珠法从鼻咽癌5-8F细胞中分选CD133+细胞;Transwell小室迁移实验检测Lenti-TK-MSC对CD133+5-8F细胞的趋向性;Lenti-TK-MSC联合更昔洛韦(ganciclovir,Lenti-TK-MSC/GCV)与CD133+5-8F细胞共培养,CCK-8试剂盒检测其对细胞的杀伤作用和旁观者效应。 结果: 成功构建重组慢病毒载体Lenti-TK,其滴度为1×108UT/ml,Lenti-TK(MOI=50)感染MSC 72 h时,感染效率达(95.1±01)%。Lenti-TK-MSC迁移至CD133+5-8F细胞组的细胞数明显多于CD133-5-8F细胞组、未分选5-8F细胞组\(83.0±8.7) vs (29.6±53)、(38.3±5.2),P=0.000\]。Lenti-TK-MSC/GCV处理组与单独GCV处理组、Lenti-TK-MSC/GCV条件培养液(即Lenti-TK-MSC加入1 mg/L GCV培养48 h的培养上清)处理组相比,CD133+5-8F细胞的存活率明显降低\(37.2±2.3)% vs (98.5±3.1)%、(83.8±34)%,P=0.000\]。Lenti-TK-MSC数量达到混合细胞总数(Lenti-TK-MSC和CD133+5-8F细胞)的20%时,CD133+5-8F细胞存活率为(68.2±2.3)%,表现出明显的旁观者杀伤效应。 结论: Lenti-TK感染后MSC对鼻咽癌CD133+5-8F细胞具有靶向迁移及杀伤作用。

关 键 词:鼻咽癌  CD133+细胞  间充质干细胞  肿瘤干细胞  肿瘤靶向基因治疗  旁观者效应
收稿时间:1/9/2013 12:00:00 AM
修稿时间:2013/2/20 0:00:00

Targeted migration and killing effect of mesenchymal stem cells infected with Lenti-TK on CD133+ cancer stem cells in nasopharyngeal carcinoma
Li Guanxue,Shen Congxiang,Wen Zhong,Zhong Pinneng,Yang Keke and Zhang Shenhua.Targeted migration and killing effect of mesenchymal stem cells infected with Lenti-TK on CD133+ cancer stem cells in nasopharyngeal carcinoma[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2013,20(2):145-152.
Authors:Li Guanxue  Shen Congxiang  Wen Zhong  Zhong Pinneng  Yang Keke and Zhang Shenhua
Institution:Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, Guangdong, China;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, Guangdong, China;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, Guangdong, China;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, Guangdong, China;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, Guangdong, China;Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, Guangdong, China
Abstract:
Keywords:nasopharyngeal carcinoma  CD133+ cell  mesenchymal stem cell  cancer stem cell  tumor targeted gene therapy  bystander effect
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