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FSHR部分基因的真核表达质粒构建和生物信息学分析
引用本文:朱秀兰,马文丽,德伟,彭翼飞,阴常欣,郑文岭.FSHR部分基因的真核表达质粒构建和生物信息学分析[J].热带医学杂志,2009,9(3).
作者姓名:朱秀兰  马文丽  德伟  彭翼飞  阴常欣  郑文岭
作者单位:1. 南方医科大学基因工程研究所,广州,510515
2. 南京医科大学生物化学与分子生物学系,南京,210029
3. 南方医科大学基因工程研究所,广州,510515;华南基因组中心,广州,510800
基金项目:广东省重点实验室建设基金(No.2004B60144)。
摘    要:目的克隆FSHR基因部分片段(145~330bp)(FSHRn),构建真核表达重组质粒,预测其编码蛋白作为候选避孕疫苗的可行性。方法提取小鼠睾丸组织的总RNA,利用RT-PCR技术反转录成cDNA,按照GenBank中小鼠FSHRN-端序列设计引物,扩增基因片段并插入pcDNA3.1/myc-His(-)B载体,重组质粒经PCR、双酶切和测序鉴定后用VectorNTI9.0软件作生物信息学分析。结果扩增片段长度为186bp,测序结果与已知序列吻合,重组真核表达质粒经PCR和双酶切鉴定获得正确重组子,生物信息学分析其编码蛋白抗原性肽段主要集中在15~20aa、22~27aa、32~36aa、42~48aa、58~67aa,与人的基因同源性为90%。结论成功克隆了FSHRn基因片段并构建了pcDNA3.1/FHSRn真核表达重组质粒;FSHRn具有良好的抗原性,FSHRn蛋白可作为良好的动物候选疫苗,为此段蛋白的深入研究和人类男性避孕疫苗的研制打下基础。

关 键 词:FSHR  疫苗  真核表达  生物信息学  

Cloning and Bioinformatics Analysis of FSHR Gene Fragment
ZHU Xiu-lan,MA Wen-li,DE Wei,PENG Yi-fei,YIN Chang-xin,ZHENG Wen-ling.Cloning and Bioinformatics Analysis of FSHR Gene Fragment[J].Journal Of Tropical Medicine,2009,9(3).
Authors:ZHU Xiu-lan  MA Wen-li  DE Wei  PENG Yi-fei  YIN Chang-xin  ZHENG Wen-ling
Institution:1. Institute of Genetic Engineering;Southern Medical University;Guangzhou 510515;2. Department of Biochemistry and Molecular Biology;Nanjing Medical University;Nanjing 210029;3. Southern Genomics Research Center;Guangzhou 510800;China
Abstract:
Keywords:FSHR  vaccine  eukaryotic expression  bioinformatics  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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