c-Myc通过缺氧诱导因子-1α调控结肠癌细胞HT-29的增殖 |
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引用本文: | 陈成,王桂华,杨熹,李小兰,陶德定,龚建平,胡俊波.c-Myc通过缺氧诱导因子-1α调控结肠癌细胞HT-29的增殖[J].医药导报,2013,32(4):438-442. |
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作者姓名: | 陈成 王桂华 杨熹 李小兰 陶德定 龚建平 胡俊波 |
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作者单位: | (华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科, 武汉430030) ; |
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基金项目: | 国家973计划资助项目(2009CB521802);国家自然科学基金资助项目(30872472,30973496,30800569) |
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摘 要: | 目的研究癌基因c-Myc对人结肠癌细胞HT-29中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对肿瘤细胞增殖的作用。方法构建高表达c-Myc的质粒pcDNA3.1-c-Myc;将构建好的pcDNA3.1-c-Myc质粒转染入HT-29细胞中,通过Western blot印迹法检测c-Myc在HT-29细胞中的表达情况。应用Real-time PCR和Western blot印迹法检测常氧和乏氧状态下HT-29细胞系中HIF-1α的mRNA和蛋白水平,同时检测HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA水平。共转染pcDNA3.1-c-Myc质粒和HIF-1α的siRNA入HT-29细胞中。应用噻唑蓝(MTT)法检测HT-29细胞的增殖情况。结果成功构建pcDNA3.1-c-Myc质粒;常氧、乏氧状态下转染pcDNA3.1-c-Myc质粒后,HT-29细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,VEGF和eNOS的mRNA水平明显升高,HIF-1α蛋白水平明显增高。高表达c-Myc的HT-29细胞增殖能力明显增强。共转染pcDNA3.1-c-Myc质粒和HIF-1α的siRNA后,HT-29细胞的增殖能力明显降低。结论在HT-29细胞系中c-Myc通过HIF-1α调控HT-29细胞的增殖。
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关 键 词: | 结肠癌 c-Myc 缺氧诱导因子-1α 细胞增殖 |
收稿时间: | 2012-10-15 |
修稿时间: | 2012-11-21 |
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