一种以TTLL12为靶点的影响细胞微管抗癌药物筛选的实验方法

【摘要】目的 建立一种以TTLL12为靶点的新的体外抗癌药物筛选实验方法。方法 以TTLL12过表达Hep 2细胞株为研究对象，Western Blot检测噻丙烯和紫杉醇对硝基化酪氨酸微管蛋白的影响，ELISA检测方法确定硝基化酪氨酸的最适浓度及药物的最适浓度，并检测新的体外药敏试验方法灵敏性、特异性和重复性。利用新的体外药敏试验筛选抗癌药物，利用Western Blot检测噻氨酯哒唑对硝基化酪氨酸微管蛋白的影响。结果 Western Blot结果显示紫杉醇组发现有硝基化酪氨酸微管蛋白条带，噻丙烯组未发现硝基化酪氨酸微管蛋白条带，紫杉醇被确定为阳性对照。噻丙烯被确定为阴性对照。ELISA试验结果显示硝基化酪氨酸浓度为400 μM，待测药物浓度为10 μM。新的体外药敏试验方法的灵敏性、特异性和重复性均较好。新的体外药敏试验筛选出敏感药物噻氨酯哒唑。Western Blot结果表明，噻氨酯哒唑可增加硝基化酪氨酸微管蛋白，具有抑制TTLL12功能的作用。结论 以TTLL12为靶点的新的体外抗癌药物筛选实验方法具有简单、快捷、稳定、敏感的的特点，对于抗癌药物的基础研究有良好的应用价值。