黄连解毒汤含药血清调控中性粒细胞功能的实验研究 |
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引用本文: | 孙慧娟,朱鏐娈,李 蕊,马雅銮.黄连解毒汤含药血清调控中性粒细胞功能的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2021,41(2):212-217. |
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作者姓名: | 孙慧娟 朱鏐娈 李 蕊 马雅銮 |
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作者单位: | 中国中医科学院中医基础理论研究所(北京 100700) |
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基金项目: | 中国中医科学院自主选题研究项目(No. YZ-1702;No. YZ-1814) |
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摘 要: | 目的 观察黄连解毒汤含药血清对体外调控中性粒细胞功能的影响。 方法 20 只 SD 大鼠每天给予黄连解毒汤 5 g/kg 灌胃,每 12 小时 1 次,共 5 次,制备黄连解毒汤含药血清。 采用流式细胞仪分选C57 BL/6 小鼠骨髓和外周血中性粒细胞,给予不同剂量的黄连解毒汤含药血清和脂多糖(LPS)刺激 3 h,采用实时荧光定量 PCR 检测中性粒细胞炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6 及 IL-12b 表达,确定 10%黄连解毒汤含药血清为最佳剂量。 将 10%黄连解毒汤含药血清用于干预活化的中性粒细胞功能:(1)中性粒细胞给予佛波醇 12-十四酸酯 13-乙酸酯(PMA)刺激 5 min,流式细胞仪检测骨髓中性粒细胞产生活性氧(ROS)情况;(2)中性粒细胞给予 LPS 刺激 3 h,采用 PicoGreen dsDNA 定量检测试剂盒检测培养上清游离 DNA (cf-DNA) 的含量;(3) 免疫荧光法检测中性粒细胞形成的中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)情况;(4)中性粒细胞给予趋化因子 CXCL2、CXCL10、CCL3 诱导 3 h,流式细胞仪检测趋化的中性粒细胞数量;(5) 中性粒细胞给予 LPS 刺激 20 h,流式细胞仪检测外周血中性粒细胞凋亡情况。 结果 PMA 刺激中性粒细胞使 ROS 显著增多(P<0.05);LPS 刺激 3 h,中性粒细胞产生的 cf-DNA 含量增多,NETs 形成增加,CXCL2,CXCL10、CCL3 使中性粒细胞趋化增多(P<0.05, P<0.01);LPS 刺激 20 h 后,外周血中性粒细胞凋亡减少(P<0.05);10% 黄连解毒汤含药血清可减少 ROS 产生,降低 cf-DNA 含量和NETs 形成,减少中性粒细胞趋化,促进中性粒细胞凋亡(P<0.05, P<0.01)。 结论 黄连解毒汤可调节中性粒细胞功能。
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关 键 词: | 黄连解毒汤 炎症因子 中性粒细胞 |
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