蛋白免疫印迹杂交法研究葛根素对于促进成骨细胞OPG/RANKL蛋白表达的影响 |
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作者姓名: | 董必晟 孙玉明 詹秀琴 |
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作者单位: | 1. 南京中医药大学中西医结合一级学科,江苏南京,210046 2. 南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京,210000 |
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基金项目: | 江苏省省属高校自然科学研究项目(编号:09KJB360002);江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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摘 要: | 目的:通过蛋白免疫印迹杂交法(Western blot法)、MTT法探讨葛根素通过OPG/RANKL蛋白对于促进成骨细胞增殖、分化机制的研究.方法:通过原代细胞培养:取新生24h的SD大鼠头盖骨,使用0.1%Ⅱ型胶原酶消化法分离出成骨细胞,使用碱性磷酸酶法鉴定成骨细胞,用MTT法确定葛根素对于促进成骨细胞增殖的最佳浓度和时间,取第四代的成骨细胞进行实验,实验分成4个组:其中对照组为10% DMEM(low glucose),其它3组浓度分别为1 mg/mL,0.1 mg/mL和0.01 mg/mL的葛根素处理组.24h后,通过Western blot方法检测OPG/RANKL蛋白的表达.结果:通过碱性磷酸酶法、MTT法,可以鉴定不同浓度葛根素处理的成骨细胞中碱性磷酸酶活性均有增高.不同浓度的葛根素处理液均可以提高OPG/RANKL蛋白的表达,其中OPG、RANKL分别与对照组比较,具有统计学差异(P<0.05).结论:葛根素可以通过OPG/RANKL系统促进成骨细胞的增殖和分化.
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关 键 词: | 葛根素 OPG RANKL 成骨细胞 小鼠 |
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