恶性疟原虫MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒的构建及序列测定 |
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引用本文: | 吴少庭,高世同.恶性疟原虫MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒的构建及序列测定[J].中国寄生虫病防治杂志,2002,15(1):18-20. |
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作者姓名: | 吴少庭 高世同 |
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摘 要: | 目的 构建恶性疟原虫FCC-1/HN株MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒重粒子pBCG5.6/MSA2,并进行序列测定。方法 根据恶性疟原虫MSA2编码基因的两侧序列设计引物,采用PCR技术扩增出MSA2编码全长片段,经低熔点脂脂糖挖块法回收纯化后,插入分枝杆菌穿梭质粒pBCG5.6/MSA2,并转化大肠杆菌DH5α,快速酚法初筛阳性重组子,阳性克隆以PCR法与限制性酶切分析鉴定后,双脱氧链终止法双向进行序列测定。结果 从恶性疟原虫基因组中扩增出约820bp的基因片段,所构建pBCG5.6/MSA2重组体阳性克隆经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致,测序结果确证了插入片段的正确性。结论 成功构建了恶性疟原虫MSA2编码基因分枝杆菌穿梭表达质粒,为恶性疟BCG疫苗的研制奠定了基础。
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关 键 词: | 恶性疟原虫 裂殖子表面抗原-2编码基因 克隆 序列分析 |
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