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丙戊酸促进大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化
作者姓名:凌徐玮  孙杰  刘畅  王怡  施勤  杨惠林
作者单位:1. 苏州大学附属第一医院骨科苏州大学苏州医学院;2. 苏州大学骨科研究所
摘    要:背景:丙戊酸作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂,具有促进细胞成骨分化的能力,但相关机制尚不明确。目的:探讨丙戊酸对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:从SD大鼠中分离提取骨髓间充质干细胞,流式细胞仪进行鉴定;CCK-8检测不同浓度丙戊酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响,以确定丙戊酸的使用浓度;然后加入丙戊酸和成骨培养基对大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化,在成骨诱导培养第7天进行碱性磷酸酶染色以及第21天进行茜素红染色;成骨诱导培养第3,7天进行q RT-PCR检测成骨相关基因及EZH2的表达;成骨诱导培养第5天进行Western blot检测Runt相关转录因子2、EZH2和H3K27me3相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8细胞增殖实验显示,随着丙戊酸浓度的增加,骨髓间充质干细胞增殖受到显著抑制;(2)碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,丙戊酸能提高细胞碱性磷酸酶的表达,增强骨矿化能力;(3)q RT-PCR结果显示,丙戊酸可提高成骨相关基因的表达,降低EZH2基因的表达;(4)Westernblot结果显示,丙戊酸使Runt相关转录因子2蛋白表达增强,EZH2和H3...

关 键 词:丙戊酸  EZH2  H3K27me3  骨髓间充质干细胞  成骨分化
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