敲低NIPBL基因调控小鼠骨髓间充质干细胞向软骨的分化

背景：目前已将NIPBL基因突变作为诊断Cornelia de Lange综合征的首选指标，但由于该病的遗传异质性，显著增加了临床诊疗难度，尤其患儿骨骼发育畸形的发生率高，其发病机制尚不明确，目前无有效治疗方案，患儿平均寿命较一般人群显著缩短。目的：探究敲低NIPBL基因对小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化能力的影响及其可能的分子调控机制。方法：将慢病毒转染NIPBL sh RNA的小鼠骨髓间充质干细胞作为sh-NIPBL组，慢病毒空载体转染的骨髓间充质干细胞作为sh-NC组，无慢病毒干扰的骨髓间充质干细胞作为空白对照组，对上述3组细胞进行成软骨诱导培养，诱导21 d后测量软骨微球最大横截面的周长，行阿利辛蓝染色鉴定其诱导分化结果，免疫荧光法检测软骨细胞Ⅱ型胶原的表达水平，应用实时荧光定量PCR法检测软骨细胞Sox-9、TGF-β1、Smad2、Smad4 m RNA表达水平。结果与结论：(1)成软骨诱导第21天，sh-NIPBL组的软骨微球最大横截面的周长明显小于对照组(P <0.05)，阿利辛蓝染色后在倒置显微镜下观察sh-NC组较sh-NIPBL组可见更多的蓝色软骨内酸性黏多糖...