新生SD大鼠大脑皮质神经元的原代培养及鉴定 |
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作者姓名: | 王京 卢思彤 吴印林 刘玉东 邹维艳 孙美群 |
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作者单位: | 蚌埠医学院组胚教研室 |
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基金项目: | 安徽省高等学校自然科学研究重大项目(KJ2019ZD26),项目负责人:孙美群;;慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室开放课题(KLICD-2022-Z4),项目负责人:孙美群~~; |
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摘 要: | 背景:培养神经元的质量是研究中枢神经系统疾病的关键所在,但培养方法一直没有统一的标准。目的:探究取材部位及阿糖胞苷处理对原代培养神经元活性、纯度及成熟度的影响。方法:选取新生24 h内的SD乳鼠,取大脑皮质表面2.0-3.0 mm处细胞,培养后24,48,72 h,用5μmol/L或10μmol/L阿糖胞苷处理48 h;另取全部大脑皮质细胞,培养后48 h用5μmol/L阿糖胞苷处理48 h。培养至第7天,倒置显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8法检测阿糖胞苷对神经元活性的影响,免疫荧光和Western blot检测神经元的纯度及成熟度。结果与结论:(1)倒置显微镜:10μmol/L阿糖胞苷24,48,72 h组神经元密度分别低于同时间下的5μmol/L阿糖胞苷组,该6组神经元突起相互之间均可连接成紧密的网状结构,神经元胞体丰满并充满折光特性;全皮质组细胞密度低于正常对照组,并可明显观察到非神经元;(2)CCK-8检测:各阿糖胞苷组细胞活性均低于正常对照组(P <0.001), 10μmol/L阿糖胞苷24,48,72 h组神经元活性低于同时间下的5μmol/L阿糖胞苷组(P &...
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关 键 词: | 阿糖胞苷 大脑皮质 神经元 原代培养 神经元活性 大鼠 |
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